Kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® Luminiscencia maximizada

Kit de ensayo para el gen reportero de la luciferasa Amplite®, *Bright Glow* utiliza una formulación luminogénica patentada para cuantificar la actividad de la luciferasa en células vivas y extractos celulares.

Descripción

Kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® Luminiscencia maximizada

Los genes indicadores comunes incluyen beta-galactosidasa, beta-glucuronidasa y luciferasa. Las ventajas de un ensayo de luciferasa son la alta sensibilidad, la ausencia de actividad de luciferasa dentro de la mayoría de los tipos de células, el amplio rango dinámico, la rapidez y el bajo costo. El gen indicador más versátil y común es la luciferasa de la luciérnaga norteamericana Photinus pyralis.

La proteína no requiere modificación postraduccional para la actividad enzimática. Ni siquiera es tóxico en alta concentración (in vivo) y puede usarse en células procariotas y eucariotas. La luciferasa de luciérnaga cataliza la oxidación bioluminiscente de la luciferina en presencia de ATP, magnesio y oxígeno.

Este kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® utiliza una formulación luminogénica patentada para cuantificar la actividad de la luciferasa en células vivas y extractos celulares. Nuestra formulación genera un producto luminiscente que da una fuerte luminiscencia al interactuar con la luciferasa. El kit proporciona todos los componentes esenciales con nuestro protocolo de ensayo optimizado de “mezclar y leer” que es compatible con los instrumentos de manejo de líquidos HTS. Tiene una sensibilidad extremadamente alta y se puede utilizar para los ensayos que requieren una sensibilidad exigente.

Nombre en ingles: Amplite® Luciferase Reporter Gene Assay Kit *Bright Glow*

Catalogo	Producto	Presentación
12518	Kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® Luminiscencia maximizada	1 placa
12519	Kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® Luminiscencia maximizada	10 placas
12520	Kit de ensayo del gen reportero de luciferasa Amplite® Luminiscencia maximizada	100 placas

SDS

Protocol

Importante: Solo para uso en investigación (RUO).

Plataforma

Lector de microplacas de luminiscencia

Placa recomendada

Blanca sólida

Componentes

Componente A: Luciferase Sensor (Light-sensitive)	1 botella
Componente B: Buffer de ensayo	1 botella (10 mL)

PREPARACION CELULAR

Para obtener guia sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html

PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO

1. Para el # de catálogo 12518, transfiera todo el contenido del buffer de reacción (componente B) a la botella del sensor de luciferasa (componente A) y mezcle bien para que la solución del sensor de luciferasa funcione.

2. Para el # de cat. 12519, agregue 10 ml de buffer de reacción (componente B) y para el # de cat. 12520, agregue 100 ml de buffer de reacción (componente B) en la botella del sensor de luciferasa (componente A) y mezcle bien. Luego, vuelva a transferir la solución resultante a la botella de buffer de reacción (componente B). Se necesitan múltiples lavados para transferir completamente el contenido. Nota: La solución de trabajo del sensor de luciferasa reconstituida no es estable. Proteger de la luz.

Imagen

Figura 1. Cinética de reacción de las células CHO-V2R-Luc utilizando el kit de ensayo de gen informador de luciferasa Amplite®. Las células CHO transfectadas de forma estable con el gen pCRE-luciferasa y el receptor 2 de vasopresina humana (V2R) se sembraron en una placa costar de fondo transparente/pared blanca de 384 pocillos a 15.000 células/pocillo/25 µl.

Luego, las células se trataron con 100 nM de vasopresina en una incubadora de CO2 al 5 % a 37 °C durante 4 horas. Se añadieron al pocillo 25 µl de solución de ensayo de luciferasa. Los datos cinéticos se tomaron cada 30 minutos durante un máximo de 3 horas con un lector de placas NOVOstar (BMG Labtech). La señal de luciferasa inducida por vasopresina es estable durante más de 3 horas.

Sustratos Amplite® para sustratos fluorogénicos

Cat. 11000 Amplite® ADHP [10-Acetyl-3,7-dihydroxyphenoxazine] CAS#: 119171-73-2

Cat. 11005 Amplite® Blue

Cat. 11009 Amplite® IR

Cat. 11011 Amplite® Red

Bibliografía

Ver todas las 11 bibliografias: Citation Explorer

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