Sustrato Amplite® IR de peroxidasa fluorogénica

Amplite IR

Amplite® IR se puede utilizar en reacciones enzimáticas acopladas para detectar la actividad de muchas oxidasas y/o enzimas/sustratos o cofactores relacionados, como glucosa, acetilcolina y colesterol, L-glutamato, aminoácidos etc.


Nuestro Amplite® IR es un sustrato de peroxidasa fluorogénica que genera fluorescencia infrarroja cercana al reaccionar con peroxidasa y H2O2. Se puede utilizar para detectar tanto H2O2 como peroxidasa.

Amplite® IR genera una sustancia que tiene una absorción máxima de 647 nm con una emisión máxima de 670 nm. Esta absorción y fluorescencia del infrarrojo cercano minimizan el fondo del ensayo que a menudo es causado por la autoabsorción y/o la autofluorescencia de muestras biológicas que rara vez absorben luz más allá de 600 nm. A diferencia de otros sustratos de HRP, como las dihidrofluoresceínas y las dihidrorodaminas, la oxidación por aire de Amplite® IR es mínima.

En comparación con Ampplex Red™, Amplite® IR genera una fluorescencia que es independiente del pH entre pH 4 y 10. Además, tiene una excelente solubilidad en agua. Es una alternativa superior a Amplex Red™ para las detecciones que requieren un pH bajo donde Amplex Red™ tiene una fluorescencia significativamente reducida. Hemos utilizado Amplite® IR para detectar HRP en bastantes inmunoensayos.

Amplite® IR también se puede utilizar para detectar trazas de H2O2. Dado que el H2O2 se produce en muchas reacciones enzimáticas redox, Amplite® IR se puede utilizar en reacciones enzimáticas acopladas para detectar la actividad de muchas oxidasas y/o enzimas/sustratos o cofactores relacionados, como glucosa, acetilcolina y colesterol, L-glutamato, aminoácidos etc.

Catalogo Producto Presentación
AAT-11009 Amplite® IT, AAT Bioquest 1 mg

Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelación a <-15 °C. Minimizar la exposición a la luz, disecado.


Lector de Microplacas de Flourescencia

Excitación 640 nm
Emisión 680 nm
Cuttoff 650 nm
Placa recomendada Placa negra


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Propiedades Espectrales

Excitación (nm) 648
Emisión (nm) 668

Preparación de Soluciones de Stock

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.

Solución madre de Amplite IR :
Agregue la cantidad apropiada de DMSO anhidro para preparar una solución madre Amplite IR de 10 a 25 mM.

Preparación de Soluciones de Trabajo

Solución de trabajo Amplite IR (2X):
Para lograr una concentración final por pocillo de 50 a 100 µM en buffer de fosfato de 50 mM o el buffer de su elección, prepare una solución de concentración de 100 a 200 µM en un tubo. Se requieren 50 µL por pocillo. Nota: Amplite IR es inestable en presencia de tioles como DTT y b-mercaptoetanol. Los tioles superiores a 10 μM (concentración final) podrían disminuir significativamente el rango dinámico del ensayo. El NADH y el glutatión (reducido de: GSH) pueden interferir con el ensayo. Nota: Recomendamos utilizar una solución madre nueva cada vez que realice experimentos.


Figura 1. La respuesta a la dosis de H2O2 se midió en una placa negra sólida de 96 pocillos con el kit de ensayo de peróxido de hidrógeno fluorimétrico Amplite®.

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