El Tinte Fluorescente CytoCalcein™ Violet 450 está diseñado para marcar células vivas de la misma manera que la calceína, AM.
Descripción
Tinte Fluorescente CytoCalcein™ Violet 450
CytoCalcein™ Violet 450 está diseñado para marcar células vivas de la misma manera que la calceína, AM. Tiene una excitación máxima a 405 nm, que coincide perfectamente con la línea láser violeta equipada en la mayoría de los citómetros de flujo, y está bien excitado por las fuentes de excitación de los microscopios de fluorescencia.
Al ingresar a las células vivas, CytoCalcein™ Violet 450, débilmente fluorescente, se hidroliza en un tinte fuertemente fluorescente que tiene un máximo de excitación/emisión de 405/450 nm. Esta separación espectral excepcional de los fluoróforos FACS típicos proporciona opciones adicionales para experimentos de multiplexación.
En comparación con el azul de calceína, CytoCalcein™ Violet 450 es más brillante y se excita mejor con la línea láser de 405 nm. CytoCalcein™ Violet 450 y CytoCalcein™ Violet 500 se han desarrollado para aplicaciones de citometría de flujo. Los tintes CytoCalcein™ exhiben propiedades biológicas similares a las de la calceína, AM. Están optimizados para las longitudes de onda de excitación de una variedad de citómetros de flujo, lo que proporciona colores adicionales para el análisis de citometría de flujo de células vivas.
CytoCalcein™ Violet 450 y CytoCalcein™ Violet 500 están bien excitados por 405 nm de láser violeta y emiten fluorescencia a 450 nm y 500 nm respectivamente.
Nombre en Ingles: CytoCalcein™ Violet 450 *Excited at 405 nm*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22012 | Tinte Fluorescente CytoCalcein™ Violet 450 | 1 mg |
Importante, Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a largo plazo: Congelar a < -15 °C. Minimizar la exposición a la luz.
Plataforma
Citómetro de flujo
| Excitación | laser 405 nm |
| Emisión | filtro 450/40 nm |
| Especificaciones Instrumento | Pacific Blue channel |
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | Juego de filtros DAPI |
| Emisión | Juego de filtros DAPI |
| Placa recomendada | Pared negra/fondo claro |
Lector de fluorescencia de microplacas
| Excitación | 405 |
| Emisión | 450 |
| Cutoff | 435 |
| Placa recomendada | Negra, solida |
Espectro
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Propiedades Espectrales
| Excitación (nm) | 406 |
| Emisión (nm) | 445 |
Propiedades Fisicas
| Peso Molecular | ~600 |
| Solvente | DMSO |
Preparación de Soluciones de Stock
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución stock CytoCalcein™ Violeta 450
Prepare una solución madre de 2 a 5 mM de CytoCalcein™ Violet 450 en DMSO anhidro de alta calidad.
Nota El detergente no iónico Pluronic® F-127 se puede utilizar para aumentar la solubilidad acuosa de los ésteres AM. En el buffer de tinción, la concentración final de Pluronic® F-127 debe ser aproximadamente del 0.02 %. Se puede comprar una variedad de productos Pluronic® F-127 en AAT Bioquest. Evite el almacenamiento prolongado de ésteres AM en presencia de Pluronic® F-127.
Preparación de Soluciones de Trabajo
Solución de trabajo CytoCalcein™ Violet 450
Prepare una solución de trabajo CytoCalcein™ Violet 450 de 1 a 10 µM en el buffer de su elección (por ejemplo, tampón Hanks y Hepes). Para la mayoría de las líneas celulares, se recomienda CytoCalcein™ Violet 450 en una concentración final de 4 a 5 µM. La concentración exacta de indicadores necesarios para la carga celular debe determinarse empíricamente.
Nota: Si sus células contienen transportadores de aniones orgánicos, se puede agregar probenecid (1 a 2,5 mM) o sulfinpirazona (0,1 a 0,25 mM) a la solución de trabajo para reducir la fuga de indicadores deesterificados.
Imagenes
Figura 1: Imagen de células HeLa vivas teñidas con CytoCalcein™ Violet 450 Excitadas a 405 nm. Los núcleos celulares se tiñeron con Nuclear Red LCS1 (n.º de catálogo 17542).
Figura 2. Imagen de fluorescencia de células HeLa teñidas con CytoCalcein™ Violet 450 Excitadas a 405 nm en una placa de 96 pocillos de pared negra/fondo transparente Costar.
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Bibliografia
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Referencias
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FAQ
Is Calcein, AM toxic to cells?
What are common laser lines used in flow cytometry?
Why is determining cell viability important?
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
Are there upgraded trypan blue derivatives for cell viability testing?
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