Tinte CytoTell™ Violet 500 es un tinte fluorescente verde excitable con láser violeta que tiñe las células de manera uniforme.
Descripción
Tinte CytoTell™ Violet 500
La citometría de flujo combinada con tinción fluorescente es una herramienta poderosa para analizar poblaciones celulares heterogéneas. CFSE es el indicador de proliferación celular preferido y ampliamente utilizado para el análisis de células vivas entre todos los tintes fluorescentes existentes.
Sin embargo, es imposible usar CFSE y sus análogos de fluoresceína para células transfectadas con GFP o para aplicaciones en las que se usa un anticuerpo marcado con FITC, ya que CFSE y sus análogos de fluoresceína tienen espectros de excitación y emisión casi idénticos a GFP o FITC. Los tintes CytoTell™ se excitan bien en las principales líneas láser, como las de 405 nm, 488 nm o 633 nm con emisiones multicolores.
Los tintes CytoTell™ tienen una citotoxicidad mínima y se utilizan para aplicaciones multicolores con líneas celulares GFP o anticuerpos marcados con FITC, ya que tienen espectros de excitación o emisión distintos de los de la fluoresceína. CytoTell™ Violet 500 es un tinte fluorescente verde excitable con láser violeta que tiñe las células de manera uniforme.
A medida que las células se dividen, el tinte se distribuye equitativamente entre las células hijas, lo que puede medirse como una reducción sucesiva a la mitad de la intensidad de fluorescencia del tinte. Las células marcadas con CytoTell™ Violet 500 se pueden fijar y permeabilizar para analizar objetivos intracelulares utilizando fijadores estándar que contienen formaldehído y buffers de permeabilización a base de saponina.
CytoTell™ Violet 500 tiene una excitación máxima de 405 nm y puede excitarse mediante la línea láser violeta (405 nm). Tiene una emisión máxima de 500 nm y se puede detectar con un filtro de paso de banda 500/20 (equivalente a BD Horizon® V500), lo que lo hace compatible con aplicaciones que utilizan anticuerpos GFP o FITC para análisis de células multicolores.
Nombre en Ingles: CytoTell™ Violet 500
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22248 | CytoTell™ Violet 500, tinte AAT Bioquest | 500 pruebas |
| AAT-22249 | CytoTell™ Violet 500, tinte AAT Bioquest | 1000 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Producto liofilizado. Almacenamiento a largo plazo: < -15 °C. Minimizar exposición a la luz. El producto se entrega con geles.
Plataforma
Citómetro de Flujo
| Excitación | 405 nm laser |
| Emisión | 525/50 nm filtro |
| Especificaciones instrumento | Canal Pacific Blue Channel |
Calculadora
Preparación de solución madre común
Tabla 1. Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de CytoTell™ Violet 500 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es sólo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos adecuados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 179.53 µL | 897.65 µL | 1.795 mL | 8.976 mL | 17.953 mL |
| 5 mM | 35.906 µL | 179.53 µL | 359.06 µL | 1.795 mL | 3.591 mL |
| 10 mM | 17.953 µL | 89.765 µL | 179.53 µL | 897.65 µL | 1.795 mL |
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre de tinte CytoTell™ (500X):
Agregue 500 l de DMSO al vial de tinte en polvo, mezcle bien con un vórtex para obtener una solución madre (500X). Nota: La solución madre debe usarse lo antes posible; cualquier solución restante debe dividirse en alícuotas y congelarse a < – 20 oC. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación y protéjalo de la luz.
PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE TRABAJO
Solución de trabajo de tinte CytoTellTM (1X):
Diluya la solución madre de DMSO 500X de 1 a 500 en Hanks y buffer Hepes 20 mM (HHBS) o el buffer de su elección, pH 7 (como 1 l de solución madre de DMSO 500X a tampón de 500 l) justo antes de su uso. Mézcle bien con un vórtex. Nota: La concentración final de la solución de trabajo del tinte debe determinarse empíricamente para diferentes tipos de células y/o condiciones experimentales. Se recomienda realizar pruebas en concentraciones que estén al menos por encima del rango de diez veces. Tal como CytoTell™ Red podría utilizar mucha menos cantidad en algunos tipos de células que las concentraciones recomendadas.
Espectro
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Propiedades Espectrales
| Excitación (nm) | 415 |
| Emisión (nm) | 499 |
Propiedades Fisicas
| Peso Molecular | 557.01 |
| Solvente | DMSO |
Imagenes
Figura 1.
Ensayo de proliferación celular con CytoTell™ Violet 500. Se tiñeron células Jurkat (~2 x 106 células/ml) con CytoTell™ Violet 500 el día 0. Las células se pasaron en serie en una proporción de 1:1 el día especificado. La intensidad de la fluorescencia se midió con un citómetro de flujo ACEA NovoCyte 3000 con canal Pacific Orange. Las sucesivas generaciones estuvieron representadas por diferentes colores.
Formatos Relacionados
Productos Alternativos
| Name | Excitation (nm) | Emission (nm) |
| CytoCalcein™ Violet 500 *Excited at 405 nm* | 420 | 505 |
| ThiolTrace™ Violet 500 | 415 | 499 |
Bibliografia
Ver todas las 29 bibliografias: Citation Explorer
Cardiomyocyte cell cycle dynamics and proliferation revealed through cardiac-specific transgenesis of fluorescent ubiquitinated cell cycle indicator (FUCCI)
Authors: Alvarez, R., Jr., Wang, B. J., Quijada, P. J., Avitabile, D., Ho, T., Shaitrit, M., Chavarria, M., Firouzi, F., Ebeid, D., Monsanto, M. M., Navarrete, N., Moshref, M., Siddiqi, S., Broughton, K. M., Bailey, B. A., Gude, N. A., Sussman, M. A.
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In Vivo Fluorescence Microendoscopic Monitoring of Stent-Induced Fibroblast Cell Proliferation in an Esophageal Mouse Model
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Long-term monitoring of live cell proliferation in presence of PVP-Hypericin: a new strategy using ms pulses of LED and the fluorescent dye CFSE
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Assessment of cell proliferation with resazurin-based fluorescent dye
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The proliferation and differentiation of osteoblasts in co-culture with human umbilical vein endothelial cells: An improved analysis using fluorescence-activated cell sorting
Authors: Zhang, Y., Schedle, A., Matejka, M., Rausch-Fan, X., Andrukhov, O.
Journal: Cell Mol Biol Lett (2010): 517-29
Application Notes
Multicolor Analysis of Cell Proliferation Using a New Panel of CytoTell™ Fluorescent Dyes
Relative Brightness of Fluorescent Dyes
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
FAQ
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
How do I stain T cells with CytoTell™ Blue?
What are common laser lines used in flow cytometry?
Can BrdU (Bromodeoxyuridine) be used in vitro?
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