Tinte CytoTell™ Violet 500

Tinte

Tinte CytoTell™ Violet 500 es un tinte fluorescente verde excitable con láser violeta que tiñe las células de manera uniforme.

Descripción

Tinte CytoTell™ Violet 500

La citometría de flujo combinada con tinción fluorescente es una herramienta poderosa para analizar poblaciones celulares heterogéneas. CFSE es el indicador de proliferación celular preferido y ampliamente utilizado para el análisis de células vivas entre todos los tintes fluorescentes existentes.

Sin embargo, es imposible usar CFSE y sus análogos de fluoresceína para células transfectadas con GFP o para aplicaciones en las que se usa un anticuerpo marcado con FITC, ya que CFSE y sus análogos de fluoresceína tienen espectros de excitación y emisión casi idénticos a GFP o FITC. Los tintes CytoTell™ se excitan bien en las principales líneas láser, como las de 405 nm, 488 nm o 633 nm con emisiones multicolores.

Los tintes CytoTell™ tienen una citotoxicidad mínima y se utilizan para aplicaciones multicolores con líneas celulares GFP o anticuerpos marcados con FITC, ya que tienen espectros de excitación o emisión distintos de los de la fluoresceína. CytoTell™ Violet 500 es un tinte fluorescente verde excitable con láser violeta que tiñe las células de manera uniforme.

A medida que las células se dividen, el tinte se distribuye equitativamente entre las células hijas, lo que puede medirse como una reducción sucesiva a la mitad de la intensidad de fluorescencia del tinte. Las células marcadas con CytoTell™ Violet 500 se pueden fijar y permeabilizar para analizar objetivos intracelulares utilizando fijadores estándar que contienen formaldehído y buffers de permeabilización a base de saponina.

CytoTell™ Violet 500 tiene una excitación máxima de 405 nm y puede excitarse mediante la línea láser violeta (405 nm). Tiene una emisión máxima de 500 nm y se puede detectar con un filtro de paso de banda 500/20 (equivalente a BD Horizon® V500), lo que lo hace compatible con aplicaciones que utilizan anticuerpos GFP o FITC para análisis de células multicolores.

Nombre en Ingles: CytoTell™ Violet 500

CatalogoProductoPresentación
AAT-22248CytoTell™ Violet 500, tinte AAT Bioquest500 pruebas
AAT-22249CytoTell™ Violet 500, tinte AAT Bioquest1000 pruebas

pdfSDSpdfProtocol

Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Producto liofilizado. Almacenamiento a largo plazo: < -15 °C. Minimizar exposición a la luz. El producto se entrega con geles.

Plataforma

Citómetro de Flujo

Excitación405 nm laser
Emisión525/50 nm filtro
Especificaciones instrumentoCanal Pacific Blue Channel

Calculadora

Preparación de solución madre común
Tabla 1. Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de CytoTell™ Violet 500 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es sólo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos adecuados.

0.1 mg0.5 mg1 mg5 mg10 mg
1 mM179.53 µL897.65 µL1.795 mL8.976 mL17.953 mL
5 mM35.906 µL179.53 µL359.06 µL1.795 mL3.591 mL
10 mM17.953 µL89.765 µL179.53 µL897.65 µL1.795 mL

PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre de tinte CytoTell™ (500X):
Agregue 500 l de DMSO al vial de tinte en polvo, mezcle bien con un vórtex para obtener una solución madre (500X). Nota: La solución madre debe usarse lo antes posible; cualquier solución restante debe dividirse en alícuotas y congelarse a < – 20  oC. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación y protéjalo de la luz.


PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN DE TRABAJO
Solución de trabajo de tinte CytoTellTM (1X):
Diluya la solución madre de DMSO 500X de 1 a 500 en Hanks y buffer Hepes 20 mM (HHBS) o el buffer de su elección, pH 7 (como 1 l de solución madre de DMSO 500X a tampón de 500 l) justo antes de su uso. Mézcle bien con un vórtex. Nota: La concentración final de la solución de trabajo del tinte debe determinarse empíricamente para diferentes tipos de células y/o condiciones experimentales. Se recomienda realizar pruebas en concentraciones que estén al menos por encima del rango de diez veces. Tal como CytoTell™ Red podría utilizar mucha menos cantidad en algunos tipos de células que las concentraciones recomendadas.

Espectro

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Propiedades Espectrales

Excitación (nm)415
Emisión (nm)499

Propiedades Fisicas

Peso Molecular557.01
SolventeDMSO

Imagenes

Figura 1.

Ensayo de proliferación celular con CytoTell™ Violet 500. Se tiñeron células Jurkat (~2 x 106 células/ml) con CytoTell™ Violet 500 el día 0. Las células se pasaron en serie en una proporción de 1:1 el día especificado. La intensidad de la fluorescencia se midió con un citómetro de flujo ACEA NovoCyte 3000 con canal Pacific Orange. Las sucesivas generaciones estuvieron representadas por diferentes colores.

Formatos Relacionados

CytoTell™ UltraGreen
CytoTell™ Blue
CytoTell™ Green
CytoTell™ Red 650
CytoTell™ Orange
CytoTell™ Red 590

Productos Alternativos

NameExcitation (nm)Emission (nm)
CytoCalcein™ Violet 500 *Excited at 405 nm*420505
ThiolTrace™ Violet 500415499

Bibliografia

Ver todas las 29 bibliografias: Citation Explorer

Cardiomyocyte cell cycle dynamics and proliferation revealed through cardiac-specific transgenesis of fluorescent ubiquitinated cell cycle indicator (FUCCI)
Authors: Alvarez, R., Jr., Wang, B. J., Quijada, P. J., Avitabile, D., Ho, T., Shaitrit, M., Chavarria, M., Firouzi, F., Ebeid, D., Monsanto, M. M., Navarrete, N., Moshref, M., Siddiqi, S., Broughton, K. M., Bailey, B. A., Gude, N. A., Sussman, M. A.
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In Vivo Fluorescence Microendoscopic Monitoring of Stent-Induced Fibroblast Cell Proliferation in an Esophageal Mouse Model
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Visualizing Breast Cancer Cell Proliferation and Invasion for Assessing Drug Efficacy with a Fluorescent Nanoprobe
Authors: Luan, M., Yu, L., Li, Y., Pan, W., Gao, X., Wan, X., Li, N., Tang, B.
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Monitoring cell proliferation in vitro with different cellular fluorescent dyes
Authors: Zolnierowicz, J., Ambrozek-Latecka, M., Kawiak, J., Wasilewska, D., Hoser, G.
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A method for evaluating the use of fluorescent dyes to track proliferation in cell lines by dye dilution
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Analysis of primitive erythroid cell proliferation and enucleation using a cyan fluorescent reporter in transgenic mice
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Synthesis of novel taspine diphenyl derivatives as fluorescence probes and inhibitors of breast cancer cell proliferation
Authors: He, H., Zhan, Y., Zhang, Y., Zhang, J., He, L.
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Long-term monitoring of live cell proliferation in presence of PVP-Hypericin: a new strategy using ms pulses of LED and the fluorescent dye CFSE
Authors: Penjweini, R., Loew, H. G., Hamblin, M. R., Kratky, K. W.
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Assessment of cell proliferation with resazurin-based fluorescent dye
Authors: Czekanska, E. M.
Journal: Methods Mol Biol (2011): 27-32

The proliferation and differentiation of osteoblasts in co-culture with human umbilical vein endothelial cells: An improved analysis using fluorescence-activated cell sorting
Authors: Zhang, Y., Schedle, A., Matejka, M., Rausch-Fan, X., Andrukhov, O.
Journal: Cell Mol Biol Lett (2010): 517-29

Application Notes

Multicolor Analysis of Cell Proliferation Using a New Panel of CytoTell™ Fluorescent Dyes
Relative Brightness of Fluorescent Dyes
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides

FAQ

Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
How do I stain T cells with CytoTell™ Blue?
What are common laser lines used in flow cytometry?
Can BrdU (Bromodeoxyuridine) be used in vitro?
Do you have a ready-to-use cell viability assay kit?

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