La Sonda fluorogénica ROS Brite™ 570 esta optimizada para la detección de especies reactivas de oxígeno (ROS). Una nueva sonda fluorogénica para medir el estrés oxidativo en las células mediante microscopía de fluorescencia convencional, imágenes de alto contenido, fluorometría de microplaca o citometría de flujo.
Descripción
Sonda fluorogénica ROS Brite™ 570
Las especies reactivas de oxígeno (ROS) son moléculas químicamente reactivas que contienen oxígeno. Ejemplos incluyen superóxido, radical hidroxilo, oxígeno singlete y peróxidos.
ROS es altamente reactivo debido a la presencia de electrones de capa de valencia no apareados. Las ROS se forman como un subproducto natural del metabolismo normal del oxígeno y tienen funciones importantes en la señalización celular y la homeostasis. Sin embargo, durante momentos de estrés ambiental (por ejemplo, exposición a los rayos UV o al calor), los niveles de ROS pueden aumentar drásticamente. Esto puede resultar en un daño significativo a las estructuras celulares. Acumulativamente, esto se conoce como estrés oxidativo.
Las ROS también son generadas por fuentes exógenas como la radiación ionizante. En condiciones de estrés oxidativo, la producción de ROS aumenta drásticamente, lo que da como resultado la alteración posterior de los lípidos, las proteínas y los ácidos nucleicos de la membrana. El daño oxidativo de estas biomoléculas está asociado con el envejecimiento, así como con una variedad de eventos patológicos, que incluyen aterosclerosis, carcinogénesis, lesión por reperfusión isquémica y trastornos neurodegenerativos.
El reactivo ROS Brite™ 570 es una nueva sonda fluorogénica para medir el estrés oxidativo en las células mediante microscopía de fluorescencia convencional, imágenes de alto contenido, fluorometría de microplacas o citometría de flujo. El reactivo ROS Brite™ 570 permeable a las células no es fluorescente y produce una fluorescencia naranja brillante tras la oxidación de ROS. La fluorescencia resultante se puede medir mediante imágenes de fluorescencia, imágenes de alto contenido, fluorometría de microplacas o citometría de flujo. Es una excelente alternativa al reactivo naranja CellROX™ (C10443) para la detección del estrés oxidativo (CellROX™ es una marca comercial de ThermoFisher).
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-16000 | ROS Brite™ 570, optimizado para la deteccion de ROS | 1mg |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelación (< -15 °C). Minimizar la exposición a la luz.
Propiedades fisicas
| Peso Molecular | 732.81 |
| Disolvente | DMSO |
Plataforma
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | Juego filtros Cy3/TRITC |
| Emisión | Juego filtros Cy3/TRITC |
| Placa Recomendada | Pared negra / fondo claro |
| Epecificación Instrumento | Juego filtros Cy3/TRITC |
Calculadora
Preparación de la solución de stock común
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de ROS Brite® 570 a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 136.461 µL | 682.305 µL | 1.365 mL | 6.823 mL | 13.646 mL |
| 5 mM | 27.292 µL | 136.461 µL | 272.922 µL | 1.365 mL | 2.729 mL |
| 10 mM | 13.646 µL | 68.231 µL | 136.461 µL | 682.305 µL | 1.365 mL |
Imagen
Figura 1. Respuesta de fluorescencia de ROS Brite™ 570 a diferentes especies reactivas de oxígeno en buffer PBS (pH 7,2). Las intensidades de fluorescencia se midieron con Ex/Em = 540/590 nm.
Figura 2. Los inhibidores de ferroptosis (DFO, Ferro-1), los secuestrantes de ROS (Trolox, Tempol), el inhibidor de apoptosis (Z-VAD), el inhibidor de necroptosis (Nec-1) o el inhibidor de autofagia (CQ) no pueden rescatar Muerte celular inducida por el inhibidor de TXNRD1 en pre-OC. Los niveles de ROS fueron detectados por ROS Brite 570 usando citometría de flujo. Fila superior: los BMDM y los pre-OC se midieron después de 24 h de incubación con un medio que contenía TRi-1 5 μM con o sin Ferrostantin-1 2 μM o DFO 50 μM. Fila inferior: los BMDM y los pre-OC se midieron después de 5 h de incubación con un medio que contenía AF 2 μM o TRi-1 5 μM con o sin Trolox 100 μM o Tempol 25 μM. n = 3 por grupo. Todos los datos de esta figura se representan como media ± DE. ns, sin significación, *P < 0,01, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. Fuente: La expresión de SLC7A11 mediada por NFATc1 impulsa la sensibilidad a los inhibidores de TXNRD1 en precursores de osteoclastos por Zhong, et.al., Redox Biology, abril de 2023.
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Referencias
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FAQ
Are NADH and ROS related?
Are there any alternatives for ethidium bromide in agarose gels?
Are there any alternatives to Cy5?
Are there any calcium indicators that don’t require probenecid (PBC)?
Are there safer alternatives to ethidium bromide?
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Total ROS Detection
Selecting the right ROS probe
Intracellular Nitric Oxide (NO) Assays
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