Este kit de ensayo de canal de cloruro colorimétrico Screen Quest™ proporciona un método colorimétrico sensible y sólido para estudiar los canales de cloruro.
Descripción
Los canales de cloruro tienen una variedad de importantes funciones fisiológicas y celulares que incluyen la regulación del pH, la homeostasis del volumen, el transporte de solutos orgánicos, la migración celular, la proliferación y diferenciación celular. Los canales de cloruro representan valiosos objetivos farmacológicos. Varios estados de enfermedades crónicas, como la fibrosis quística y el síndrome de Bartter, se deben a defectos en las funciones de los canales de cloruro.
Sin embargo, las tecnologías existentes para la detección de moduladores de los canales de cloruro son un compromiso entre el rendimiento, la sensibilidad y la relevancia fisiológica. El kit de ensayo colorimétrico de canales de cloruro Screen Quest™ proporciona un método colorimétrico sensible y sólido para estudiar los canales de cloruro.
El ensayo se basa en nuestro indicador de yoduro patentado (Iodide Blue™) para medir la concentración de yoduro, este ensayo detectó tan solo 30 nM de yoduro. El kit de ensayo de canales de cloruro Screen Quest™ proporciona un método de ensayo optimizado para monitorear los canales de cloruro.
El ensayo se puede realizar en un conveniente formato de placa de microtitulación de 96 pocillos o de 384 pocillos y se puede adaptar fácilmente a la automatización.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-36350 | Screen Quest™ Colorimetric Chloride Channel Assay Kit | 10 placas |
| AAT-36351 | Screen Quest™ Colorimetric Chloride Channel Assay Kit | 100 placas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Lector de Microplacas de Absorbancia
| Absorbancia | 630, 380, o 405 nm |
| Placa recomendada | Fondo claro |
Componentes
| Componente A: Iodide Blue™ Sensor | 1 botella (50 mL) |
| Componente B: Iodide Sensor Enhancer (100X) | 1 vial (0.5 mL) |
| Componente C: Loading Buffer | 1 botella (100 mL) |
| Componente D: Cell Lysis Buffer (10X) | 1 botella (5 mL) |
PREPARACION CELULAR
Para obtener guias sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
1. Buffer de lisis celular (1X)
Agregue el vial completo de buffer de lisis celular 10X (componente D) a 45 ml de H2O estéril y mezcle bien. Tenga en cuenta que 5 ml de buffer de lisis celular 1X es suficiente para una placa. Guarde el buffer de lisis celular 1X no utilizado a 4°C.
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
Solución Iodide Sensor Enhancer (1X)
Agregue 50 µl de potenciador de sensor de yoduro 100X (componente B) a 5 ml de H2O estéril y mezcle bien. Nota: La solución 1X I- Sensor Enhancer no es estable; usar dentro de las 2 horas posteriores a la dilución. Nota: Cada línea celular debe evaluarse individualmente para determinar la dilución óptima de la solución I-Sensor Enhancer. Observamos que la solución 0.1X I- Sensor Enhancer funciona incluso mejor para algunas líneas celulares.
Imagen
Figura 1. La respuesta a la dosis de NaI se midió con el kit de ensayo de canal de cloruro colorimétrico Screen Quest™ en una placa transparente de 96 pocillos.
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Referencias
Ver todas las 44 referencias: Citation Explorer
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Application Notes (en Ingles)
A New Red Fluorescent & Robust Screen Quest™ Rhod-4™ Ca2+Indicator for Screening GPCR & Ca2+ Channel Targets
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A Non-Radioactive Photometric Assay for Glucose Uptake in Insulin-Responsive 3T3-L1 Adipocytes
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