Este kit está optimizado para detectar simultáneamente apoptosis celular (rojo y/o verde), necrosis (verde) y células sanas (azul) con un citómetro de flujo o un microscopio de fluorescencia.
Descripción
Kit II de detección de multiplexación apoptótica y necrótica Cell Meter™ Tres colores de fluorescencia
Nuestros kits de ensayo Cell Meter™ son un conjunto de herramientas para monitorear la viabilidad celular. Hay una variedad de parámetros que se pueden utilizar.
Este kit en particular está diseñado para monitorear simultáneamente células apoptóticas, necróticas y sanas. La apoptosis se describe como un proceso activo y programado de desmantelamiento celular autónomo que evita provocar inflamación. En la apoptosis, la fosfatidilserina (PS) se transfiere a la valva externa de la membrana plasmática. Como indicador universal de las etapas inicial/intermedia de la apoptosis celular, la aparición de fosfatidilserina en la superficie celular se puede detectar antes de que se observen cambios morfológicos.
El sensor de PS utilizado en este kit tiene fluorescencia roja al unirse a la membrana PS. La necrosis se ha caracterizado como una muerte celular pasiva y accidental resultante de perturbaciones ambientales con la liberación incontrolada de contenidos celulares inflamatorios. La pérdida de la integridad de la membrana plasmática, como lo demuestra la capacidad de un DNA Nuclear Green™ DCS1 (Ex/Em = 490/525 nm) impermeable a la membrana para marcar el núcleo, representa un enfoque sencillo para demostrar la apoptosis y la necrosis en etapa tardía.
Además, este kit también proporciona un tinte de etiquetado de citoplasma de células vivas, CytoCalcein™ Violet 450 (Ex/Em = 405/450 nm), para marcar el citoplasma de células vivas. Este kit está optimizado para detectar simultáneamente apoptosis celular (rojo y/o verde), necrosis (verde) y células sanas (azul) con un citómetro de flujo o un microscopio de fluorescencia.
Nombre en Ingles: Cell Meter™ Apoptotic and Necrotic Multiplexing Detection Kit II *Triple Fluorescence Colors*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22843 | Kit II de detección de multiplexación apoptótica y necrótica Cell Meter™ | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a <-15 °C. Minimizar exposición a la luz.
Componentes
| Componente A: 100X Apopxin™ Deep Red | 1 vial (200 µL) |
| Componente B: Assay Buffer | 1 frasco (50 mL) |
| Componente C: 200X Nuclear Green™ DCS1 | 1 vial (100 µL) |
| Componente D: CytoCalcein™ Violet 450 | 1 vial (liofilizado/polvo) |
Plataforma
Citómetro de Flujo
| Excitación | 405 nm, 488 nm, 633 nm laser |
| Emisión | 450/40 nm, 530/30 nm, 660/20 nm filter |
| Especificaciones instrumento | Pacific Blue, FITC, APC channel |
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | DAPI, FITC, Cy5 filter sets |
| Emisión | DAPI, FITC, Cy5 filter sets |
| Placa Recomendada | Pared negra/fondo claro |
Imagenes
Figura 1.
La detección de la actividad de unión de Apopxin™ Deep Red a fosfatidilserina en células Jurkat utilizando el kit II de detección de multiplexación apoptótica y necrótica Cell Meter™. Las imágenes de fluorescencia que muestran células vivas (azul, teñidas con CytoCalcein™ Violet 450), apoptóticas (rojas, teñidas con Apopxin™ Deep Red) y necróticas (verde, indicadas con tinción Nuclear Green™ DCS1) en células Jurkat inducidas por 1 Estaurosporina μM durante 3 horas.
Las imágenes de fluorescencia de las células se tomaron con el microscopio de fluorescencia Olympus a través del canal Violet, Cy5 y FITC respectivamente. Las imágenes individuales tomadas de cada canal de la misma población celular se fusionaron como se muestra arriba. A: Células de control no inducidas; B: tinción triple de células inducidas por estaurosporina.
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Referencias
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