Este kit está optimizado para detectar simultáneamente apoptosis celular (verde), necrosis (azul y/o verde) y células sanas (rojo) con un microscopio de fluorescencia.
Descripción
Kit de detección de células vivas, apoptóticas y necróticas con multiplexación Cell Meter™ III Colores de fluorescencia triple
Nuestros kits de ensayo Cell Meter™ son un conjunto de herramientas para monitorear la viabilidad celular. Hay una variedad de parámetros que se pueden utilizar.
Este kit en particular está diseñado para monitorear simultáneamente células apoptóticas, necróticas y sanas. La apoptosis es un proceso activo y programado de desmantelamiento celular autónomo que evita provocar inflamación. En la apoptosis, la fosfatidilserina (PS) se transfiere a la valva externa de la membrana plasmática. Como indicador universal de las etapas inicial/intermedia de la apoptosis celular, la aparición de fosfatidilserina en la superficie celular se puede detectar antes de que se observen cambios morfológicos.
El conjugado del sensor de PS Anexina V-iFluor® 488 tiene fluorescencia verde al unirse a la membrana PS. La necrosis se ha caracterizado como una muerte celular pasiva y accidental resultante de perturbaciones ambientales con liberación incontrolada de contenidos celulares inflamatorios. La pérdida de integridad de la membrana plasmática, como lo demuestra la capacidad de un Nuclear Blue™ DCS1 impermeable a la membrana (Ex/Em = 350/461 nm) para marcar el núcleo, representa un enfoque sencillo para demostrar la etapa tardía de la apoptosis y la necrosis.
Además, este kit también proporciona un tinte de etiquetado de células vivas, Cellbrite™ Red (Ex/Em = 613/631 nm), para marcar células sanas no apoptóticas.
Este kit está optimizado para detectar simultáneamente apoptosis celular (verde), necrosis (azul y/o verde) y células sanas (rojo) con un microscopio de fluorescencia.
Nombre en Ingles: Cell Meter™ Multiplexing Live, Apoptotic and Necrotic Cell Detection Kit III *Triple Fluorescence Colors*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22846 | Kit II de detección de multiplexación apoptótica y necrótica Cell Meter™ | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a <-15 °C. Minimizar exposición a la luz.
Componentes
| Componente A: 100X Annexin V-iFluor™ 488 conjugate | 1 vial (200 uL) |
| Componente B: Assay Buffer | 1 frasco (50 mL) |
| Componente C: 200X Nuclear Blue™ DCS1 | 1 vial (100 uL) |
| Componente D: 200X Cellbrite™ Red | 1 vial (100 uL) |
Plataforma
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | 494 nm (apoptosis) / 350 nm (necrosis) / 613 nm (live) |
| Emisión | 520 nm (apoptosis) / 461 nm (necrosis) / 631 nm (live) |
| Placa Recomendada | Pared negra/fondo claro |
| Especificaciones Instrumento | FITC filter (apoptosis) / DAPI filter (necrosis) / Cy5 filter (live) |
Imagenes
Figura 1.
Imágenes de fluorescencia de células HeLa marcadas con el kit de detección de necróticos, apoptóticos y vivos multiplexados Cell Meter™ Triple fluorescencia (n.° de cat. 22846). Se sembraron células HeLa a razón de 100.000 células/pocillo/100 µl durante la noche en una placa de 96 pocillos con pared negra y fondo transparente.
Las células se trataron con estaurosporina (SS) 0-500 nM a 37oC durante 4 horas (A-C), o se fijaron en etanol (D), luego se incubaron con una solución de ensayo de fluorescencia triple durante 1 hora. La señal de fluorescencia se midió utilizando un microscopio de fluorescencia con un filtro Cy5 para células sanas (rojo), filtro FITC para células apoptóticas (verde) y filtro DAPI para células necróticas (azul), respectivamente.
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Referencias
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