Kit iFluor® 350 PSA™ con IgG anti-ratón de cabra

El kit de imagen iFluor® 350 PSA™ con IgG anti-ratón de cabra es unas opción muy superior al kit Alexa Fluor 350 basado en tiramida u otros kits de tiramida fluorescente o TSA espectralmente similares.

Descripción

Kit de imagen iFluor® 350 PSA™ con IgG anti-ratón de cabra

El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados.

En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor foto estabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC.

El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano picante (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.

En comparación con los reactivos de tiramida, los conjugados Styramide™ tienen la capacidad de marcar el objetivo con mayor eficiencia y, por lo tanto, generar una señal de fluorescencia significativamente mayor. Los conjugados de Styramide™ también permiten un consumo significativamente menor de anticuerpo primario en comparación con el método de conjugado directo estándar o la amplificación de tiramida con el mismo nivel de sensibilidad.

El kit iFluor® 350 PSA es unas opción superior para el kit Alexa Fluor 350 basado en tiramida u otros kits de tiramida fluorescente o TSA espectralmente similares.

Nombre en ingles: iFluor® 350 PSA™ Imaging Kit with Goat Anti-Mouse IgG

CatalogoProductoPresentación
AAT-45250Kit de imagen iFluor® 350 PSA™ con IgG anti-ratón de cabra100 pruebas

Importante: Solo para uso en investigación (RUO).

Plataforma

Microscopio de Fluorescencia

ExcitaciónJuego de filtros DAPI
EmisiónJuego de filtros DAPI
Placa Recomendada Pared negra/fondo claro
Especificaciones InstrumentoJuego de filtros DAPI

Componentes

Componente A: iFluor™ 350 Styramide™ conjugate1 vial (polvo liofilizado)
Componente B: Styramide™ Reaction Buffer1 botella (10 mL)
Componente C: DMSO1 vial (100 µL)
Componente D: Secondary Antibody-HRP (Goat Anti-Mouse IgG-HRP)1 vial (100 µL) (100X)
Componente E: Stabilized 3% Hydrogen Peroxide (H2O2)1 botella (11 mL)

Espectro

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Propiedades Espectrales

Factor de Corrección (260 nm)0.83
Factor de Corrección (280 nm)0.23
Coeficiente de Extinción (cm -1 M -1)200001
Excitación (nm)345
Emisión (nm)450
Rendimiento cuántico0.951
1 aqueous buffer (pH 7.2)

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.

Solución madre de Styramide™ (100X)

Agregue 100 µL de DMSO en el vial de conjugado de Styramide™ marcado con iFluor™ 350 (Componente A) para preparar una solución madre de Styramide™ 100X. Nota: Haga alícuotas de un solo uso y almacene la solución madre 100X sin usar a 2-8 °C en un lugar oscuro y evite repetir los ciclos de congelación y descongelación.

Solución de H2O2 (100X)

Agregue 1 mL de peróxido de hidrógeno al 3% (Componente E) a 9 mL de ddH2O. Nota: Prepare la solución 100X H2O2 fresca el día de su uso.


PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO

Solución de trabajo de Styramide™ (1X)

Cada 1 ml de buffer de reacción requiere 10 µl de solución madre de Styramide™ y 10 µl de solución madre de H2O2. Nota: El Styramide™ proporcionado es suficiente para 100 pruebas basadas en 100 µL de solución de trabajo de Styramide™ necesarios por cubreobjetos o por pocillo en una microplaca de 96 pocillos. Nota: La solución de trabajo Styramide™ debe usarse dentro de las 2 horas posteriores a la preparación y evitar la exposición directa a la luz.

Solución de trabajo de anticuerpo secundario-HRP

Diluya la solución madre de anticuerpo secundario-HRP 100X 1:100 en PBS con BSA al 1%. Nota: El anticuerpo secundario-HRP provisto en este kit es suficiente para 100 pruebas basadas en 100 µL de solución de trabajo de HRP por cubreobjetos o por pocillo en una microplaca de 96 pocillos.

Imagenes

Figura 1. El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados. En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor fotoestabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC.

El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano picante (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.

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1 aqueous buffer (pH 7.2)

Application Notes (en Ingles)

A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
Annexin V

FAQ

Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
Are there any alternatives to Cy5?
Are there any alternatives to indocyanine green (ICG)?
Can DAPI bind to RNA?
Can DAPI stain dead cells?

AssayWise (en Ingles)

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Hydroxyl Radical Detection
Peroxidase Detection
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