Indicador de calcio Fluo-4 y Fluo-3 se utilizan con mayor frecuencia entre los indicadores de calcio excitables por luz visible.
Descripción
Indicador de calcio Fluo-4 AM *Grado Ultrapuro* *CAS 273221-67-3*
La medición del calcio es fundamental para numerosas investigaciones biológicas. Las sondas fluorescentes que muestran respuestas espectrales al unirse al calcio han permitido a los investigadores investigar cambios en las concentraciones de calcio libre intracelular mediante el uso de microscopía de fluorescencia, citometría de flujo, espectroscopia de fluorescencia y lectores de microplacas de fluorescencia.
Fluo-3 y Fluo-4 se utilizan con mayor frecuencia entre los indicadores de calcio excitables por luz visible. Fluo-4 es un análogo de Fluo-3 con los dos sustituyentes de cloro reemplazados por flúor, lo que da como resultado una mayor excitación de fluorescencia a 488 nm y, en consecuencia, niveles de señal de fluorescencia más altos. Las células pueden cargarse con las formas de éster AM de estos indicadores de calcio agregando el indicador disuelto directamente a las placas que contienen células cultivadas.
Sin embargo, Fluo-3 AM y Fluo-4 AM solo son moderadamente fluorescentes en células vivas tras la hidrólisis de esterasa y requieren condiciones duras de carga celular para maximizar sus respuestas de calcio celular. Los colorantes de calcio Fluo-8® y Cal-520® se han desarrollado para mejorar la carga celular y la respuesta del calcio mientras se mantiene la conveniente longitud de onda espectral Fluo-3 y Fluo-4 de excitación máxima a ~490 nm y emisión máxima a ~520 nm.
Nombre en Ingles: Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-20550 | Indicador de calcio Fluo-4 AM *Grado Ultrapuro* | 1 mg |
| AAT-20551 | Indicador de calcio Fluo-4 AM *Grado Ultrapuro* | 10 x 50ug |
| AAT-20552 | Indicador de calcio Fluo-4 AM *Grado Ultrapuro* | 5 x 50ug |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento a <-15 °C. Minimizar exposición a la luz. Producto se entrega con geles.
Plataforma
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | FITC |
| Emisión | FITC |
| Placa recomendada | Pared negra / fondo claro |
Lector de microplacas de Fluorescencia
| Excitación | 490 nm |
| Emisión | 525 nm |
| Cutoff | 515 nm |
| Placa Recomendada | Pared negra / fondo claro |
| Epecificaciones Instrumento | Modo de lectura inferior/Manejo de líquidos programable |
Calculadora
Preparación de solución madre común
Tabla 1. Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de Fluo-4 AM *Grado ultrapuro* *CAS 273221-67-3* a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es sólo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos adecuados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 91.162 µL | 455.809 µL | 911.619 µL | 4.558 mL | 9.116 mL |
| 5 mM | 18.232 µL | 91.162 µL | 182.324 µL | 911.619 µL | 1.823 mL |
| 10 mM | 9.116 µL | 45.581 µL | 91.162 µL | 455.809 µL | 911.619 µL |
Espectro
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Propiedades espectrales
| Coeficiente de Extinción (cm -1 M -1) | 82000 |
| Excitación (nm) | 495 |
| Emisión (nm) | 528 |
| Rendimiento cuántico | 0.161 |
Propiedades físicas
| Constante de disociación (Kd, nM) | 345 |
| Peso Molecular | 1096.95 |
| Solvente | DMSO |
Imagen
Figura 1. Estructura quimica de Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3*.
Productos alternos (upgrades)
Productos similares
| Nombre | Excitación (nm) | Emisión (nm) | Coeficiente extinción (cm -1 M -1) | Rendimiento cuántico |
| Fluo-3, AM *CAS 121714-22-5* | 506 | 515 | 86,0001 | 0.151 |
| Fluo-3, AM *UltraPure grade* *CAS 121714-22-5* | 506 | 515 | 86,0001 | 0.151 |
| Fluo-3, AM *Bulk package* *CAS 121714-22-5* | 506 | 515 | 86,0001 | 0.151 |
| Fluo-3FF, AM *UltraPure grade* *Cell permeant* | 506 | 515 | 86,0001 | 0.151 |
| Fluo-8H™, AM | 495 | 516 | 23430 | 0.161 |
| Fluo-8L™, AM | 495 | 516 | 23430 | 0.161 |
| Fluo-8FF™, AM | 495 | 516 | 23430 | 0.161 |
| Fluo-5F, AM *Cell permeant* | 494 | 516 | – | – |
| Fluo-5N, AM *Cell permeant* | 494 | 516 | – | – |
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Bibliografia
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Application Notes
A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators
A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets
A Novel NO Wash Probeniceid-Free Calcium Assay for Functional Analysis of GPCR and Calcium Channel Targets
Cal-520 ® , Cal-590 ™, and Cal-630™ Calcium Detection Reagents
Calbryte™ 520, Calbryte™ 590 and Calbryte™ 630 Calcium Detection Reagents
FAQ
Can I intracellularly measure mitochondria calcium flux and changes in mitochondria membrane potential at the same time?
How is intracellular calcium measured?
What is a calcium flux assay?
What is fluorescence quantum yield?
Are there any calcium indicators that don’t require probenecid (PBC)?
AssayWise
Calbryte™ series now available
A Simple End-Point Calcium Assay Using a Green Fluorescent Indicator Fluo-8E™, AM
Multicolor Intracellular Calcium Detection Probes
Cal-520™ Calcium Indicators
Cal-590™ Calcium Indicators