Descripción
Ensayo de peróxido de hidrógeno intracelular fluorimétrico Cell Meter™ optimizada para microscopia de fluorescencia
El peróxido de hidrógeno es un subproducto metabólico de oxígeno reactivo que sirve como un regulador clave para una serie de estados relacionados con el estrés oxidativo. Está involucrado en muchos eventos biológicos que están relacionados con el asma, la aterosclerosis, la vasculopatía diabética, la osteoporosis, varias enfermedades neurodegenerativas y el síndrome de Down.
La medición de esta especie reactiva es útil para determinar cómo el estrés oxidativo modula varias vías intracelulares. Este kit de ensayo de peróxido de hidrógeno intracelular fluorimétrico Cell Meter™ utiliza nuestro exclusivo sensor de peróxido azul OxiVision™ para cuantificar el peróxido de hidrógeno en células vivas. El sensor de peróxido azul OxiVision™ es permeable a las células y genera fluorescencia azul cuando reacciona con el peróxido de hidrógeno.
Este kit proporciona una herramienta sensible para monitorear el nivel de peróxido de hidrógeno en células vivas y está optimizado para usarse en microscopía de fluorescencia.
Nombre en Ingles: Cell Meter™ Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Blue Fluorescence*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-11504 | Ensayo de peróxido de hidrógeno intracelular fluorimétrico Cell Meter™ | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Microscopio de Fluorescencia
| Excitación | Filtro DAPI |
| Emisión | Filtro DAPI |
| Placa recomendada | Pared negra/Fondo claro |
Componentes
| Componente A: OxiVision™ Blue peroxide sensor | 1 vial |
| Componente B: Buffer de ensayo | 1 botella (20 ml)) |
| Componente C: DMSO | 1 vial (100 µL) |
Preparacion de Células
Para obtener información sobre la preparación de muestras de células, visite https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
- Solución madre del sensor de peróxido azul OxiVision™ (500X):
Agregue 40 µl de DMSO (componente C) en el vial del sensor de peróxido azul OxiVision™ (componente A) y mezcle bien para preparar la solución madre del sensor de peróxido azul OxiVision™ 500X. Nota: 20 µL de solución madre del sensor de peróxido azul OxiVision™ reconstituida es suficiente para 1 placa. La solución madre debe usarse con prontitud. Proteger de la luz.
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
- Agregue 10 μL de solución madre del sensor de peróxido azul OxiVision™ 500X en 500 μL de tampón de ensayo (componente B) y mezcle bien para que la solución del sensor de peróxido azul OxiVision™ funcione. Nota: Esta solución de trabajo del sensor de peróxido azul OxiVision™ no es estable; prepárelo según sea necesario antes de usarlo.
Figura 1. Imágenes de fluorescencia de peróxido de hidrógeno intracelular en células HeLa utilizando el kit de ensayo de peróxido de hidrógeno intracelular fluorimétrico Cell Meter™ (n.° de cat. 11504). Se sembraron células HeLa a razón de 10.000 células/pocillo/100 µl durante la noche en una placa de 96 pocillos Costar de pared negra/fondo transparente. H2O2 100 µM: las células HeLa se tiñeron con el sensor de peróxido OxiVision™ Blue durante 30 minutos y se trataron con peróxido de hidrógeno 100 µM a 37 °C durante 90 minutos. Control: Las células se tiñeron con el sensor de peróxido OxiVision™ Blue pero sin tratamiento con peróxido de hidrógeno. Las señales de fluorescencia se midieron utilizando un microscopio de fluorescencia con un filtro DAPI.
Productos Adicionales
Cell Meter™ Mitochondrial Hydroxyl Radical Detection Kit *Red Fluorescence*
Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit *Green Fluorescence*
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Peroxynitrite Assay Kit *Green Fluorescence*
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Peroxynitrite Assay Kit *Optimized for Flow Cytometry*
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Nitric Oxide (NO) Activity Assay Kit *Orange Fluorescence Optimized for Microplate Reader*
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Nitric Oxide (NO) Activity Assay Kit *Orange Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
Cell Meter™ Fluorimetric Intracellular Nitric Oxide (NO) Activity Assay Kit *Red Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*
Cell Meter™ Live Cell Caspase 3/7 Binding Assay Kit *Green Fluorescence*
Cell Meter™ Live Cell Caspase 3/7 Binding Assay Kit *Red Fluorescence*
Cell Meter™ Live Cell Caspase 1 Binding Assay Kit *Green Fluorescence*
Bibliografía
Plasma-activated medium selectively eliminates undifferentiated human induced pluripotent stem cells
Authors: Matsumoto, Ryo and Shimizu, Kazunori and Nagashima, Takunori and Tanaka, Hiromasa and Mizuno, Masaaki and Kikkawa, Fumitaka and Hori, Masaru and Honda, Hiroyuki
Journal: Regenerative Therapy (2016): 55–63
Referencias
Ver todos las 152 referencias: Citation Explorer
Genetically encoded fluorescent indicator for intracellular hydrogen peroxide
Authors: Belousov VV, Fradkov AF, Lukyanov KA, Staroverov DB, Shakhbazov KS, Terskikh AV, Lukyanov S.
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Effects of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) on alkaline phosphatase activity and matrix mineralization of odontoblast and osteoblast cell lines
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Fluorescent quenching method for determination of trace hydrogen peroxide in rain water
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A parallel proteomic and metabolomic analysis of the hydrogen peroxide- and Sty1p-dependent stress response in Schizosaccharomyces pombe
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Comparative effects of alpha-tocopherol and gamma-tocotrienol against hydrogen peroxide induced apoptosis on primary-cultured astrocytes
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Journal: J Neurol Sci (2006): 5
Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
Authors: Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
Journal: Biochim Biophys Acta (2006): 216
Specific aquaporins facilitate the diffusion of hydrogen peroxide across membranes
Authors: Bienert GP, Moller AL, Kristiansen KA, Schulz A, Moller IM, Schjoerring JK, Jahn TP.
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Simple and rapid determination of hydrogen peroxide using phosphine-based fluorescent reagents with sodium tungstate dihydrate
Authors: Onoda M, Uchiyama T, Mawatari K, Kaneko K, Nakagomi K.
Journal: Anal Sci (2006): 815
Cardioprotective role of endogenous hydrogen peroxide during ischemia-reperfusion injury in canine coronary microcirculation in vivo
Authors: Yada T, Shimokawa H, Hiramatsu O, Haruna Y, Morita Y, Kashihara N, Shinozaki Y, Mori H, Goto M, Ogasawara Y, Kajiya F.
Journal: Am J Physiol Heart Circ Physiol (2006): H1138
Effect of antisense oligonucleotide against Smac/DIABLO on inhibition of hydrogen peroxide induced myocardial apoptosis of neonatal rats
Authors: Liang PF, Huang XY, Long JH, Xiao MZ, Yang XH, Zhang PH.
Journal: Zhonghua Shao Shang Za Zhi (2006): 175
Application Notes
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
A Comparison of Fluorescent Red Calcium Indicators for Detecting Intracellular Calcium Mobilization in CHO Cells
A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators
A New Red Fluorescent & Robust Screen Quest™ Rhod-4™ Ca2+Indicator for Screening GPCR & Ca2+ Channel Targets
A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets
FAQ
ROS Detection: ROS probe selection guide.
Are NADH and ROS related?
Are there any alternatives for ethidium bromide in agarose gels?
Are there any alternatives to Cy5?
Are there any calcium indicators that don’t require probenecid (PBC)?
AssayWise
Selecting the right ROS probe
Hydrogen Peroxide Detection
Intracellular Nitric Oxide (NO) Assays
Intracellular Total ROS Activity Assays
Multicolor Intracellular Calcium Detection Probes