El kit de ensayo de actividad de superóxido mitocondrial fluorimétrico Cell Meter™ proporciona un ensayo fluorimétrico sensible de un solo paso para detectar superóxido mitocondrial en células vivas con una hora de incubación.
Descripción
Ensayo de actividad de superóxido mitocondrial fluorimétrico Cell Meter™ fluorescencia verde
Las mitocondrias son los principales productores de superóxido celular. La producción de niveles bajos a moderados de superóxido es fundamental para la regulación adecuada de muchos procesos celulares esenciales, incluida la expresión génica, la transducción de señales y la adaptación muscular al entrenamiento de ejercicios de resistencia.
La producción descontrolada de superóxido mitocondrial puede desencadenar un daño oxidativo celular que contribuye a la patogenia de una amplia variedad de trastornos, como el cáncer, las enfermedades cardiovasculares, las enfermedades neurodegenerativas y el envejecimiento. La detección de superóxido mitocondrial intracelular es de gran importancia para comprender la regulación redox celular adecuada y el impacto de su desregulación en diversas patologías.
El kit de detección de superóxido intracelular fluorimétrico Cell Meter™ utiliza MitoROS™ 520, nuestro exclusivo indicador de superóxido, para cuantificar el nivel de superóxido en células vivas. MitoROS™ 520 es permeable a las células y puede detectar rápida y selectivamente el superóxido en las mitocondrias. Genera fluorescencia verde al reaccionar con superóxido.
El kit de ensayo de actividad de superóxido mitocondrial fluorimétrico Cell Meter™ proporciona un ensayo fluorimétrico sensible de un solo paso para detectar superóxido mitocondrial en células vivas con una hora de incubación. Este kit se puede utilizar para aplicaciones de citometría de flujo y microscopía de fluorescencia.
Nombre en Ingles: Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit *Green Fluorescence*
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-16060 | Ensayo de actividad de superóxido mitocondrial fluorimétrico Cell Meter™ fluorescencia verde | 200 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Microscopio de Flourescencia
| Excitación | Juego de filtros FITC |
| Emisión | Juego de filtros FITC |
| Placa recomendada | Pared negra, fondo claro |
| Especificaciones instrumento | Juego de filtros FITC |
Citómetro de Flujo
| Excitación | FITC filter set |
| Emisión | FITC filter set |
| Placa Recomemdada | Pared negra/fondo claro |
| Especificaciones Instrumento | FITC filter set |
Componentes
| Componente A: MitoROS™ 520 | 1 vial |
| Componente B: Buffer de ensayo | 1 botella (20 mL) |
| Componente C: DMSO | 1 vial (100 µL) |
PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre de MitoROS™ 520 (500X):
Agregue 50 µL de DMSO (Componente C) en el vial de MitoROS™ 520 (Componente A) y mezcle bien. Nota: 25 µL de solución madre de MitoROS™ 520 reconstituida es suficiente para 1 placa. Nota: la porción no utilizada puede dividirse en alícuotas y almacenarse a < -20 °C durante más de un mes si los tubos se sellan herméticamente y se mantienen alejados de la luz. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
Solo para microscopio de fluorescencia
Agregue 5 μL de solución madre de MitoROS™ 520 reconstituida con DMSO 500X en 2 mL de buffer de ensayo (componente B) y mezcle bien. Nota: Esta solución de trabajo no es estable y debe prepararse recién antes de su uso.
Para obtener guia sobre la preparación de muestras de células, visite
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
Espectro
Abrir en Advanced Spectrum Viewer
Propiedades Espectrales
| Excitación (nm) | 513 |
| Emisión (nm) | 537 |
Imagenes
Figura 1. Imágenes de fluorescencia de la medición de superóxido en células de macrófagos usando cat#16060. Se sembraron células RAW 264.7 a 100.000 células/pocillo/100 µl durante la noche en una placa de fondo transparente/pared negra de 96 pocillos. Tratamiento con AMA: las células se trataron con antimicina A (AMA) 5 µM a 37 °C durante 2 horas y luego se incubaron con MitoROS™ 520 durante 1 hora. Control sin tratar: las células RAW 264.7 se incubaron con MitoROS™ 520 a 37 °C durante 1 hora sin tratamiento con AMA. La señal de fluorescencia se midió utilizando un microscopio de fluorescencia con un filtro FITC
Figura 2. Imágenes de fluorescencia de la medición de superóxido endógeno en células de macrófagos usando Cat#16060. Se sembraron células RAW 264.7 a 100.000 células/pocillo/100 µl durante la noche en una placa de fondo transparente/pared negra de 96 pocillos. Tratamiento con LPS: Las células se incubaron con MitoROS™ 520 durante 1 hora, luego se trataron con 200 μg/mL de lipopolisacárido (LPS) a 37 ºC durante 16 horas. Control sin tratar: Se incubaron células RAW 264.7 con MitoROS™ 520 a 37 ºC durante 1 hora sin tratamiento con LPS. La señal de fluorescencia se midió utilizando un microscopio de fluorescencia con un filtro FITC.
Productos Alternativos
| Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Flow Cytometry* |
| Cell Meter™ Fluorimetric Mitochondrial Superoxide Activity Assay Kit*Optimized for Microplate Reader* |
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Bibliografía
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Referencias
Ver todas las 52 referencias: Citation Explorer
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