DNP Styramide es un reemplazo superior para DNP tyramide que se usa ampliamente en las conocidas amplificaciones de señal de tyramide (TSA).
Descripción
El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados.
En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor fotoestabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC. El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano picante (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.
En comparación con los reactivos de tiramida, los conjugados Styramide™ tienen la capacidad de marcar el objetivo con mayor eficiencia y, por lo tanto, generar una señal de fluorescencia significativamente mayor. Los conjugados de Styramide™ también permiten un consumo significativamente menor de anticuerpo primario en comparación con el método de conjugado directo estándar o la amplificación de tiramida con el mismo nivel de sensibilidad. DNP Styramide es un reemplazo superior para DNP tyramide que se usa ampliamente en las conocidas amplificaciones de señal de tyramide (TSA).
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-45310 | DNP Styramide | 100 slides |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelar a (< -15 °C), Minimizar la exposición a la luz.
Propiedades Físicas
| Peso Molecular | 575.62 |
| Disolvente | DMSO |
Calculadora
Preparación de la solución de stock común
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica de DNP Styramide (Reemplazo Superior para DNP tyramide* a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
| 0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 173.726 µL | 868.629 µL | 1.737 mL | 8.686 mL | 17.373 mL |
| 5 mM | 34.745 µL | 173.726 µL | 347.451 µL | 1.737 mL | 3.475 mL |
| 10 mM | 17.373 µL | 86.863 µL | 173.726 µL | 868.629 µL | 1.737 mL |
PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
2. Solución madre de Styramide™ (100X)
Agregue 100 µL de DMSO en el vial de DNP conjugado de Styramide™ marcado con biotina para preparar una solución madre de Styramide™ 100X.
Nota: Haga alícuotas de un solo uso y almacene la solución madre 100X no utilizada a -20 oC en un lugar oscuro y evite repetir los ciclos de congelación y descongelación.
1. Solución madre de H2O2 (100X)
Agregue 10 µL de peróxido de hidrógeno al 3 % (no incluido) a 90 µL de ddH2O.
Nota: Prepare la solución 100X H2O2 fresca el día de su uso.
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
1. Solución de trabajo de Styramide™ (1X)
Cada 1 ml de buffer de reacción requiere 10 µl de solución madre de Styramide™ y 10 µl de solución madre de H2O2.
Nota El Styramide™ proporcionado es suficiente para 100 pruebas basadas en 100 µL de solución de trabajo de Styramide™ necesarios por cubreobjetos o por pocillo en una microplaca de 96 pocillos.
Nota La solución de trabajo Styramide™ debe usarse dentro de las 2 horas posteriores a la preparación y evitar la exposición directa a la luz.
2. Solución de trabajo de anticuerpo secundario-HRP
Realice la concentración adecuada de la solución de trabajo de anticuerpo secundario-HRP según las recomendaciones del fabricante.
3. Solución de trabajo de anticuerpos anti-DIG
Realice la concentración adecuada de la solución de trabajo del conjugado de anticuerpos anti-DIG según las recomendaciones del fabricante.
Imagen
Figura 1. El sistema Power Styramide™ Signal Amplification (PSA™) es uno de los métodos más sensibles que pueden detectar objetivos de abundancia extremadamente baja en células y tejidos con una señal de fluorescencia mejorada de 10 a 50 veces mayor que los reactivos de tiramida (TSA) ampliamente utilizados. En combinación con nuestros colorantes superiores iFluor® que tienen mayor intensidad de fluorescencia, mayor fotoestabilidad y mayor solubilidad en agua, los conjugados de Styramide™ marcados con colorantes iFluor® pueden generar señales de fluorescencia con una precisión y sensibilidad significativamente mayores (más de 100 veces) que el estándar ICC/ IF/IHC. El PSA utiliza la actividad catalítica de la peroxidasa de rábano picante (HRP) para la deposición covalente de fluoróforos in situ. Los radicales PSA tienen una reactividad mucho mayor que los radicales tiramida, lo que hace que el sistema PSA sea mucho más rápido, robusto y sensible que los reactivos TSA tradicionales.
Aplication Notes (en Ingles)
A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators
A New Protein Crosslinking Method for Labeling and Modifying Antibodies
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
Annexin V
FAQ
Are there any alternatives to BrdU (Bromodeoxyuridine)?
Are there any alternatives to Cy5?
Are there any alternatives to indocyanine green (ICG)?
Can DAPI bind to RNA?
Can DAPI stain dead cells?