Indicadores Fluo-8®, Cal-520®, Calbryte™, así como ensayos de flujo de calcio para rastrear la movilización de calcio con señales fluorescentes intensas y en una variedad de opciones de longitud de onda. que van desde el ultravioleta al infrarrojo.
Los ensayos de flujo de calcio basados en células se utilizan ampliamente en la detección de alto rendimiento (HTS) para determinar la señalización estimulada por agonistas e inhibida por antagonistas a través de receptores acoplados a proteína G (GPCR), una gran familia de proteínas integrales de membrana y una clase objetivo importante en fármacos. descubrimiento. Las mediciones precisas de la concentración y movilización del calcio intracelular permiten una comprensión más completa de las vías de señalización reguladas por el calcio, las funciones celulares y los procesos patológicos.
AAT Bioquest ha desarrollado la colección más grande de indicadores de calcio, incluidos los indicadores de calcio Fluo-8®, Cal-520® y Calbryte™, así como ensayos de flujo de calcio para rastrear la movilización de calcio con señales fluorescentes intensas y en una variedad de opciones de longitud de onda. que van desde el ultravioleta al infrarrojo.
Cuantificación del calcio citosólico
El calcio es un mensajero ubicuo que afecta una serie de vías de transducción de señales, incluidos los cambios inducidos por el calcio en la confirmación de proteínas, la regulación de los niveles de calcio citosólico y de orgánulos, la naturaleza altamente localizada de la transducción de señales mediada por calcio y sus funciones específicas en la excitabilidad, exocitosis y motilidad. , apoptosis y transcripción. Estas vías regulan muchos procesos celulares clave, incluida la neurotransmisión, la proliferación celular y la contracción muscular. En condiciones normales con respecto al líquido extracelular, la concentración citoplasmática de calcio en reposo es relativamente baja, igual o inferior a 100 nM. La señalización del calcio se activa mediante la liberación de iones de calcio de las reservas intracelulares o mediante un influjo de calcio extracelular a través de los canales iónicos de la membrana plasmática. Las células estimuladas pueden aumentar la concentración de calcio citoplasmático hasta 500 a 1000 nM.
Derivados de éster AM fluorescente para imágenes de calcio de células vivas
Los indicadores fluorescentes que muestran respuestas espectrales al unirse al calcio han permitido a los investigadores investigar cambios en las concentraciones de calcio libre intracelular mediante el uso de microscopía de fluorescencia, citometría de flujo, espectroscopia de fluorescencia y lectores de microplacas de fluorescencia. Para facilitar la detección de la movilización de calcio intracelular y promover la difusión pasiva, se unen grupos funcionales de éster acetoximetílico (éster AM) a la estructura central de los indicadores de calcio. Esto aumenta la hidrofobicidad del indicador, permitiéndole penetrar fácilmente las membranas plasmáticas intactas y mejora la sensibilidad del indicador al minimizar la fluorescencia de fondo no específica porque los indicadores conjugados con éster AM son esencialmente no fluorescentes e inactivos.
La actividad se inicia una vez que la sonda ingresa a una célula viva y solo después de que las esterasas intracelulares eliminan los grupos funcionales éster de AM. Una vez activadas, las sondas detectan el calcio mediante quelación y responden generando una señal de fluorescencia relativa a la concentración de calcio. Indicadores como Fluo-8®, AM (Cat No. 21080), Cal-520®, AM (Cat No. 21131) y Calbryte™ 520, AM (Cat No. 20653) se han utilizado ampliamente en imágenes de calcio, flujo de calcio ensayos y ensayos de detección de alto rendimiento (HTS) basados en células para el descubrimiento de fármacos. Los indicadores de calcio son compatibles con el uso en citometría de flujo, microscopía de fluorescencia y plataforma de microplacas de fluorescencia. Además de ofrecer indicadores de calcio fluorescentes y luminiscentes, también proporcionamos varias moléculas de señalización de calcio no fluorescentes y quelantes para medir y manipular el calcio intracelular y extracelular.
Indicadores de calcio de longitud de onda única
Características clave de los indicadores de calcio de longitud de onda única
• Fluorescencia de fondo mínima en niveles de calcio en reposo
• Relaciones señal-fondo mejoradas
• Retención celular muy mejorada
• Formatos permeables a células para análisis de calcio en células vivas (compatibles con imágenes, citometría de flujo y ensayos de microplacas, como HTS)
• Formatos impermeables a las células para carga mediante microinyección, pipeta de parche o carga pinocítica
• Formatos excitables por luz ultravioleta (UV), violeta y visible.
• Los formatos de baja, media y alta afinidad proporcionan un rango de sensibilidad para satisfacer muchas aplicaciones.
La liberación de calcio intracelular inducida por ATP se midió con Calbryte™ 630 AM. Las células se incubaron con colorante Calbryte™ 630 AM durante 30 minutos a 37 °C antes de agregar ATP 10 µM a las células. Se adquirió la línea base y el resto de células se analizaron tras la adición de ATP. La respuesta se midió a lo largo del tiempo. El análisis se realizó en el canal APC del citómetro de flujo NovoCyte™ 3000.
Tabla 1. Indicadores de calcio fluorescentes verdes para la detección de calcio intracelularTinte Ex/Em (nm) Filtros Kd¹ Φ² FCa/FFree³ Brillo Relativo Señal/Interferencia Presentación Cat No. Fluo-8®, AM 494/515 FITC 389 nM 0.16 ∼200 fold *** *** 10 x 50 µg 21082 Fluo-4, AM 492/527 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold ** ** 10 x 50 µg 20551 Fluo-3, AM 506/515 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold * * 20 x 50 µg 21013 Cal Green™ 1, hexapotassium salt 498/517 FITC 190 nM 0.75 ∼14 fold *** *** 10 x 50 µg 20500 Cal Green™ 1, AM [Equivalent to Calcium Green-1, AM] 498/517 FITC 190 nM 0.75 ∼14 fold *** *** 10 x 50 µg 20501 Calbryte™ 520, AM 492/514 FITC 1.2 µM 0.75 ∼300 fold ***** ***** 10 x 50 µg 20651 Cal-520®, AM 492/514 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold *** *** 10 x 50 µg 21130
| Tinte | Ex/Em (nm) | Filtros | Kd¹ | Φ² | FCa/FFree³ | Brillo Relativo | Señal/Interferencia | Presentación | Cat No. |
| Fluo-8®, AM | 494/515 | FITC | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | *** | *** | 10 x 50 µg | 21082 |
| Fluo-4, AM | 492/527 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | ** | ** | 10 x 50 µg | 20551 |
| Fluo-3, AM | 506/515 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | * | * | 20 x 50 µg | 21013 |
| Cal Green™ 1, hexapotassium salt | 498/517 | FITC | 190 nM | 0.75 | ∼14 fold | *** | *** | 10 x 50 µg | 20500 |
| Cal Green™ 1, AM [Equivalent to Calcium Green-1, AM] | 498/517 | FITC | 190 nM | 0.75 | ∼14 fold | *** | *** | 10 x 50 µg | 20501 |
| Calbryte™ 520, AM | 492/514 | FITC | 1.2 µM | 0.75 | ∼300 fold | ***** | ***** | 10 x 50 µg | 20651 |
| Cal-520®, AM | 492/514 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | *** | *** | 10 x 50 µg | 21130 |
- Kd = Constante de disociación del calcio.
- Φ = Rendimiento cuántico de fluorescencia en presencia de citrato de calcio 5 mM.
- FCa/FFree = Aumento de la intensidad de fluorescencia del indicador unido a calcio en relación con su forma de indicador libre de calcio.
La afinidad y la especificidad son las preocupaciones más importantes para una sonda de calcio, además de otros factores como la citotoxicidad y la permeabilidad celular. El color también es un aspecto distinto de cero y debe adaptarse al diseño experimental. Los espectros de las sondas de calcio desplazadas al rojo están bien separados de los de FITC, Alexa Fluor® 488 y GFP, lo que las hace ideales para multiplexar ensayos intracelulares con líneas celulares GFP o anticuerpos marcados con FITC/Alexa Fluor® 488. Rhod-2 se utiliza con mayor frecuencia entre los indicadores de calcio fluorescentes rojos. Sin embargo, Rhod-2 AM sólo es moderadamente fluorescente en células vivas tras la hidrólisis de esterasa y tiene respuestas de calcio celular muy pequeñas. Se han desarrollado otras sondas rojas, como Cal-590™, para mejorar la carga celular y la respuesta de calcio mientras se mantiene el perfil espectral para seguir siendo compatible con el conjunto de filtros común TRITC/Cy3®.
Se sembraron células CHO-K1 durante la noche. Se añadió solución de trabajo de tinte Calbryte™ 590 AM a concentraciones finales de 5 uM con Pluronic® F-127 en el medio (la solución 2X se preparó en tampón HH y se añadió a las células). Las células se incubaron durante 60 minutos a 37ºC. Las células se lavaron una vez con tampón HH y se añadió tampón HH a las células y se incubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se agregaron diferentes concentraciones de ATP y la respuesta se midió con FlexStation 3 usando un límite Ex/Em = 540/590 nm = 570 nm.
Tabla 2. Indicadores de calcio fluorescentes rojos para la detección de calcio intracelularTinte Ex (nm) Em (nm) Kd¹ Φ² Coeficiente extinción Presentación Cat# Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 563 584 - 0.62 78000 1 mg 20508 Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 563 584 1 µm 0.62 78000 1 mg 20509 Cal-590L® Dextran Conjugate *MW 10,000* 569 590 -230 µm 0.62 - 1 mg 20525 Cal-590™ AM 574 588 561 nm 0.62 78000 5x50 µg 20510 Cal-590™ AM 574 588 561 nm 0.62 78000 10x50 µg 20511 Cal-590™ AM 574 588 561 nm 0.62 78000 1 mg 20512 Cal-590™, sodium salt 574 588 561 nm 0.62 78000 5x50 µg 20515 Cal-590™, potassium salt 574 588 561 nm 0.62 78000 5x50 µg 20518 Cal-590™, potassium salt 574 588 561 nm 0.62 78000 1 mg 20519 Calbryte™ 590 AM 581 593 1400 nM - - 2x50 µg 20700 Calbryte™ 590 AM 581 593 1400 nM - - 1 mg 20702 Calbryte™ 590, potassium salt 581 593 1400 nM - - 5x50 µg 20706 Calbryte™ 590, potassium salt 581 593 1400 nM - - 1 mg 20707 Calbryte™ 630 AM 607 624 1200 nM - - 2x50 µg 20720 Calbryte™ 630 AM 607 624 1200 nM - - 10x50 µg 20721 Calbryte™ 630 AM 607 624 1200 nM - - 1 mg 20722 Calbryte™ 630, potassium salt 607 624 1200 nM - - 5x50 µg 20727 Cal-630™ AM 609 626 792 nm 0.37 - 5x50 µg 20530 Cal-630™ AM 609 626 792 nm 0.37 - 10x50 µg 20531 Cal-630™ AM 609 626 792 nm 0.37 - 1 mg 20532 Cal-630™, sodium salt 609 626 792 nm 0.37 - 5x50 µg 20535 Cal-630™, potassium salt 609 626 792 nm 0.37 - 5x50 µg 20538 Cal-630™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 609 626 - 0.37 - 1 mg 20546 Cal-670™, potassium salt 667 680 853 nM - - 10x50 µg 20455 Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 667 680 - - - 1 mg 20456 Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 667 680 - - - 1 mg 20457 Cal-770™, potassium salt 758 783 850 nM - - 10x50 µg 20460 Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 758 783 - - - 1 mg 20461 Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 758 783 - - - 1 mg 20462
| Tinte | Ex (nm) | Em (nm) | Kd¹ | Φ² | Coeficiente extinción | Presentación | Cat# |
| Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 563 | 584 | - | 0.62 | 78000 | 1 mg | 20508 |
| Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 563 | 584 | 1 µm | 0.62 | 78000 | 1 mg | 20509 |
| Cal-590L® Dextran Conjugate *MW 10,000* | 569 | 590 | -230 µm | 0.62 | - | 1 mg | 20525 |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 5x50 µg | 20510 |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 10x50 µg | 20511 |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 1 mg | 20512 |
| Cal-590™, sodium salt | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 5x50 µg | 20515 |
| Cal-590™, potassium salt | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 5x50 µg | 20518 |
| Cal-590™, potassium salt | 574 | 588 | 561 nm | 0.62 | 78000 | 1 mg | 20519 |
| Calbryte™ 590 AM | 581 | 593 | 1400 nM | - | - | 2x50 µg | 20700 |
| Calbryte™ 590 AM | 581 | 593 | 1400 nM | - | - | 1 mg | 20702 |
| Calbryte™ 590, potassium salt | 581 | 593 | 1400 nM | - | - | 5x50 µg | 20706 |
| Calbryte™ 590, potassium salt | 581 | 593 | 1400 nM | - | - | 1 mg | 20707 |
| Calbryte™ 630 AM | 607 | 624 | 1200 nM | - | - | 2x50 µg | 20720 |
| Calbryte™ 630 AM | 607 | 624 | 1200 nM | - | - | 10x50 µg | 20721 |
| Calbryte™ 630 AM | 607 | 624 | 1200 nM | - | - | 1 mg | 20722 |
| Calbryte™ 630, potassium salt | 607 | 624 | 1200 nM | - | - | 5x50 µg | 20727 |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | 792 nm | 0.37 | - | 5x50 µg | 20530 |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | 792 nm | 0.37 | - | 10x50 µg | 20531 |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | 792 nm | 0.37 | - | 1 mg | 20532 |
| Cal-630™, sodium salt | 609 | 626 | 792 nm | 0.37 | - | 5x50 µg | 20535 |
| Cal-630™, potassium salt | 609 | 626 | 792 nm | 0.37 | - | 5x50 µg | 20538 |
| Cal-630™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 609 | 626 | - | 0.37 | - | 1 mg | 20546 |
| Cal-670™, potassium salt | 667 | 680 | 853 nM | - | - | 10x50 µg | 20455 |
| Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 667 | 680 | - | - | - | 1 mg | 20456 |
| Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 667 | 680 | - | - | - | 1 mg | 20457 |
| Cal-770™, potassium salt | 758 | 783 | 850 nM | - | - | 10x50 µg | 20460 |
| Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 758 | 783 | - | - | - | 1 mg | 20461 |
| Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 758 | 783 | - | - | - | 1 mg | 20462 |
Tabla 3. Indicadores de calcio Rhod de longitud de onda larga para la detección de calcio intracelularTinte Ex/Em (nm) Filtros Kd¹ Presentación Cat No. Rhod-2, AM 552/576 TRITC 570 nM 20 x 50 µg 21064 Rhod-4, AM 521/549 TRITC 451 nM 10 x 50 µg 21122 Rhod-5N, AM 557/579 TRITC 300 µM 1 mg 21070 Rhod-FF, AM 552/576 TRITC 19 µM 10 x 50 µg 21078
| Tinte | Ex/Em (nm) | Filtros | Kd¹ | Presentación | Cat No. |
| Rhod-2, AM | 552/576 | TRITC | 570 nM | 20 x 50 µg | 21064 |
| Rhod-4, AM | 521/549 | TRITC | 451 nM | 10 x 50 µg | 21122 |
| Rhod-5N, AM | 557/579 | TRITC | 300 µM | 1 mg | 21070 |
| Rhod-FF, AM | 552/576 | TRITC | 19 µM | 10 x 50 µg | 21078 |
- Kd = Constante de disociación del calcio.
Indicadores de cacio radiométricos
Características clave de los indicadores ratiométricos de calcio.
Tabla 4. Indicadores ratiométricos de calcio de excitación dual para imágenes de calcio en células vivas.Tinte Ex/Em (zero calcium) Ex/Em (high calcium) Filtros Kd¹ Presentación Cat No. Fura-2, AM *UltraPure Grade* *CAS 108964-32-5* 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 1 mg 21021 Fura-2, AM *UltraPure Grade* *CAS 108964-32-5* 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 20x50 µg 21023 Fura-2, AM *CAS 108964-32-5* 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 1 mg 21020 Fura-2, AM *CAS 108964-32-5* 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 50 mg 21022 Fura-2, pentapotassium salt *CAS 113694-64-7* 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 1 mg 21025 Fura-2, pentasodium salt 340/510 380/510 Fura 2 145 nM 1 mg 21026 Fura-FF, AM *CAS 348079-12-9* 340/510 380/510 Fura 2 5.5 µM 10x50 µg 21027 Fura-FF, pentapotassium salt *CAS 192140-58-2* 340/510 380/510 Fura 2 5.5 µM 10x50 µg 21028 Fura-FF, pentapotassium salt *CAS 192140-58-2* 340/510 380/510 Fura 2 5.5 µM 1 mg 21029 Fura-8™, AM 355/525 415/525 Fura 2 260 nM 10x50 µg 21056 Fura-8™, AM 355/525 415/525 Fura 2 260 nM 1 mg 21055 Fura-8™, pentapotassium salt 355/525 415/525 Fura 2 260 nM 1 mg 21057 Fura-8™, pentasodium salt 355/525 415/525 Fura 2 260 nM 1 mg 21058 Fura-8FF™, AM 355/525 415/525 Fura 2 6 µM 10x50 µg 20620 Fura-8FF™, pentapotassium salt 355/525 415/525 Fura 2 6 µM 10x50 µg 20621 Fura-10™, AM 355/525 415/525 Fura 2 N/D 5x50 µg 21114 Fura-10™, AM 355/525 415/525 Fura 2 N/D 1 mg 21115 Fura-10™, potassium salt 355/525 415/525 Fura 2 N/D 5x50 µg 21110 Fura-10™, potassium salt 355/525 415/525 Fura 2 N/D 1 mg 21111
| Tinte | Ex/Em (zero calcium) | Ex/Em (high calcium) | Filtros | Kd¹ | Presentación | Cat No. |
| Fura-2, AM *UltraPure Grade* *CAS 108964-32-5* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 1 mg | 21021 |
| Fura-2, AM *UltraPure Grade* *CAS 108964-32-5* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 20x50 µg | 21023 |
| Fura-2, AM *CAS 108964-32-5* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 1 mg | 21020 |
| Fura-2, AM *CAS 108964-32-5* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 50 mg | 21022 |
| Fura-2, pentapotassium salt *CAS 113694-64-7* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 1 mg | 21025 |
| Fura-2, pentasodium salt | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 145 nM | 1 mg | 21026 |
| Fura-FF, AM *CAS 348079-12-9* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 5.5 µM | 10x50 µg | 21027 |
| Fura-FF, pentapotassium salt *CAS 192140-58-2* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 5.5 µM | 10x50 µg | 21028 |
| Fura-FF, pentapotassium salt *CAS 192140-58-2* | 340/510 | 380/510 | Fura 2 | 5.5 µM | 1 mg | 21029 |
| Fura-8™, AM | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 260 nM | 10x50 µg | 21056 |
| Fura-8™, AM | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 260 nM | 1 mg | 21055 |
| Fura-8™, pentapotassium salt | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 260 nM | 1 mg | 21057 |
| Fura-8™, pentasodium salt | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 260 nM | 1 mg | 21058 |
| Fura-8FF™, AM | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 6 µM | 10x50 µg | 20620 |
| Fura-8FF™, pentapotassium salt | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | 6 µM | 10x50 µg | 20621 |
| Fura-10™, AM | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | N/D | 5x50 µg | 21114 |
| Fura-10™, AM | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | N/D | 1 mg | 21115 |
| Fura-10™, potassium salt | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | N/D | 5x50 µg | 21110 |
| Fura-10™, potassium salt | 355/525 | 415/525 | Fura 2 | N/D | 1 mg | 21111 |
Table 5. Indicadores ratiométricos de calcio de doble emisión para imágenes de calcio en células vivas.
Tinte Ex/Em (zero calcium) Ex/Em (high calcium) Filtro Kd¹ Presentación Cat No. Indo-1, AM *CAS 112926-02-0* 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 1 mg 21030 Indo-1, AM *CAS 112926-02-0* 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 50 mg 21033 Indo-1, AM *UltraPure Grade* *CAS 112926-02-0* 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 1 mg 21032 Indo-1, AM *UltraPure Grade* *CAS 112926-02-0* 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 20x50 µg 21036 Indo-1, pentapotassium salt *CAS 132319-21-9* 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 1 mg 21040 Indo-1, pentasodium salt 355/475 355/400 Indo-1 230 nM 1 mg 21044 Cal Red™ R525/650 AM 490/660 490/525 FITC 230 nM 10x50 µg 20591 Cal Red™ R525/650 AM 490/660 490/525 FITC 230 nM 1 mg 20590 Cal Red™ R525/650 potassium salt 490/660 490/525 FITC 230 nM 5x50 µg 20588
| Tinte | Ex/Em (zero calcium) | Ex/Em (high calcium) | Filtro | Kd¹ | Presentación | Cat No. |
| Indo-1, AM *CAS 112926-02-0* | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 1 mg | 21030 |
| Indo-1, AM *CAS 112926-02-0* | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 50 mg | 21033 |
| Indo-1, AM *UltraPure Grade* *CAS 112926-02-0* | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 1 mg | 21032 |
| Indo-1, AM *UltraPure Grade* *CAS 112926-02-0* | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 20x50 µg | 21036 |
| Indo-1, pentapotassium salt *CAS 132319-21-9* | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 1 mg | 21040 |
| Indo-1, pentasodium salt | 355/475 | 355/400 | Indo-1 | 230 nM | 1 mg | 21044 |
| Cal Red™ R525/650 AM | 490/660 | 490/525 | FITC | 230 nM | 10x50 µg | 20591 |
| Cal Red™ R525/650 AM | 490/660 | 490/525 | FITC | 230 nM | 1 mg | 20590 |
| Cal Red™ R525/650 potassium salt | 490/660 | 490/525 | FITC | 230 nM | 5x50 µg | 20588 |
Table 6. Indicadores ratiométricos de calcio de doble excitación y doble emisión para imágenes de calcio en células vivas.Tinte Ex/Em (zero calcium) Ex/Em (high calcium) Cutoff Kd¹ Presentación Cat No. Fura Red, AM *CAS 149732-62-7* 435/630 470/650 610, 630 400 nM 10x50 µg 21048 Fura Red, AM *CAS 149732-62-7* 435/630 470/650 610, 630 400 nM 1 mg 21046 Fura Red, potassium salt 435/630 470/650 610, 630 400 nM 10x50 µg 21047 Fura Red, potassium salt 435/630 470/650 610, 630 400 nM 1 mg 21045
| Tinte | Ex/Em (zero calcium) | Ex/Em (high calcium) | Cutoff | Kd¹ | Presentación | Cat No. |
| Fura Red, AM *CAS 149732-62-7* | 435/630 | 470/650 | 610, 630 | 400 nM | 10x50 µg | 21048 |
| Fura Red, AM *CAS 149732-62-7* | 435/630 | 470/650 | 610, 630 | 400 nM | 1 mg | 21046 |
| Fura Red, potassium salt | 435/630 | 470/650 | 610, 630 | 400 nM | 10x50 µg | 21047 |
| Fura Red, potassium salt | 435/630 | 470/650 | 610, 630 | 400 nM | 1 mg | 21045 |
Indicadores de calcio Calbryte™
La serie Calbryte™ es una familia de indicadores de calcio más brillantes y robustos desarrollados para monitorear la movilización de calcio intracelular. Incluye tres nuevos indicadores de calcio, Calbryte™ 520, Calbryte™ 590 y Calbryte™ 630, que difieren principalmente en sus longitudes de onda de absorbancia y emisión. Las sondas Calbryte™ emiten señales de fluorescencia con características de señal a fondo significativamente más altas y tienen una retención celular enormemente mejorada. La serie Calbryte™ se ha optimizado para su uso con microscopios de fluorescencia, lectores de microplacas de fluorescencia y citómetros de flujo. También se pueden utilizar en aplicaciones de detección de alto rendimiento.
Respuesta de calcio inducida por ATP libre de probenecid medida en células CHO-K1. Se añadieron 100 µl de 10 µg/ml de Calbryte-520 AM en tampón HH o 10 µg/ml de Fluo-4 en tampón HH y se incubaron durante 45 minutos a 37 °C. Luego se eliminó la solución de carga de tinte y se reemplazó con 200 µl de tampón HH/pocillo. FlexStation 3 añadió carbacol (50 µl/pocillo) para lograr las concentraciones finales indicadas.
Características clave de los indicadores de calcio Calbryte™
• Rendimiento probado, relación señal-ruido superior y propiedades de retención intracelular
• Las sondas Calbryte™ son significativamente más brillantes que cualquier otro indicador de calcio en las mismas condiciones.
• Relaciones señal-fondo muy mejoradas
• Retención intracelular mejorada, elimina el uso de probenecid.
• Carga de celdas rápida y cómoda en 45 a 60 minutos
• Localización citosólica homogénea.
• Calbryte™ 590 y Calbryte™ 630 con desplazamiento al rojo se pueden usar con GFP u otros tintes fluorescentes verdes para multiplexación
• Disponibles como ésteres de AM permeables a la membrana (compatibles con imágenes, citometría de flujo y ensayos de microplacas, como HTS)
• Disponibles como derivados de sal impermeables a la membrana para carga mediante microinyección, pipeta de parche o carga pinocítica.
• Disponible como tinte reactivo para conjugación con un portador.
La dosis-respuesta de carbacol se midió en células CHO-M1 con Calbryte™ 520 AM y Fluo-4 AM. Se sembraron células CHO-M1 durante la noche a razón de 50.000 células/100 µl/pocillo en una placa costar de 96 pocillos con pared negra y fondo transparente. Se añadieron 100 µl de 10 µg/ml de Calbryte™ 520 AM en tampón HH o 10 µg/ml de Fluo-4 en tampón HH y se incubaron durante 45 minutos a 37 °C. Luego se eliminó la solución de carga de tinte y se reemplazó con 200 µl de tampón HH/pocillo. FlexStation 3 añadió carbacol (50 µl/pocillo) para lograr las concentraciones finales indicadas.
Tabla 7. Indicadores de calcio Calbryte™ para imágenes de calcio en células vivas.Tinte Ex (nm) Em (nm) Filter Set Kd¹ FCa/FFree² Presentación Cat No. Calbryte™ 520, AM 493 515 FITC 1.2 µM ∼300 fold 2x50 µg 20650 Calbryte™ 520, AM 493 515 FITC 1.2 µM ∼300 fold 10x50 µg 20651 Calbryte™ 520, AM 493 515 FITC 1.2 µM ∼300 fold 1 mg 20653 Calbryte™ 520, potassium salt 493 515 FITC 1.2 µM ∼300 fold 2x50 µg 20656 Calbryte™ 520, potassium salt 493 515 FITC 1.2 µM ∼300 fold 10x50 µg 20658 Calbryte™ 520L, AM 493 515 FITC 100 µM ∼300 fold 10x50 µg 20640 Calbryte™ 520L, potassium salt 493 515 FITC 100 µM ∼300 fold 10x50 µg 20642 Calbryte™-520XL azide 493 515 FITC 300 µM ∼300 fold 1 mg 20643 Calbryte™-520XL azide 493 515 FITC 300 µM ∼300 fold 10x50 µg 20645 Calbryte™ 590, AM 581 593 Cy3/TRITC 1.4 µM ∼300 fold 2x50 µg 20700
| Tinte | Ex (nm) | Em (nm) | Filter Set | Kd¹ | FCa/FFree² | Presentación | Cat No. |
| Calbryte™ 520, AM | 493 | 515 | FITC | 1.2 µM | ∼300 fold | 2x50 µg | 20650 |
| Calbryte™ 520, AM | 493 | 515 | FITC | 1.2 µM | ∼300 fold | 10x50 µg | 20651 |
| Calbryte™ 520, AM | 493 | 515 | FITC | 1.2 µM | ∼300 fold | 1 mg | 20653 |
| Calbryte™ 520, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 1.2 µM | ∼300 fold | 2x50 µg | 20656 |
| Calbryte™ 520, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 1.2 µM | ∼300 fold | 10x50 µg | 20658 |
| Calbryte™ 520L, AM | 493 | 515 | FITC | 100 µM | ∼300 fold | 10x50 µg | 20640 |
| Calbryte™ 520L, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 100 µM | ∼300 fold | 10x50 µg | 20642 |
| Calbryte™-520XL azide | 493 | 515 | FITC | 300 µM | ∼300 fold | 1 mg | 20643 |
| Calbryte™-520XL azide | 493 | 515 | FITC | 300 µM | ∼300 fold | 10x50 µg | 20645 |
| Calbryte™ 590, AM | 581 | 593 | Cy3/TRITC | 1.4 µM | ∼300 fold | 2x50 µg | 20700 |
Indicadores de calcio Cal-520®
La serie de indicadores de calcio Cal-520® es la cartera más completa de colorantes fluorogénicos sensibles al calcio. Incluye seis indicadores únicos, Cal-500™, Cal-520®, Cal-590™, Cal-630™, Cal-670™ y Cal-770™, que difieren principalmente en su absorbancia y longitudes de onda de emisión. Cada uno de los indicadores emite una fluorescencia mínima en niveles de calcio en reposo y aumenta su intensidad de fluorescencia >100 veces en concentraciones saturadas de calcio. La serie de indicadores Cal-520® está disponible como ésteres de AM permeables a la membrana y como derivados de sal y conjugados de dextrano permeables a la membrana.
Características clave de los indicadores de calcio Cal-520®
• Mayores relaciones señal-fondo que Fluo-3, Fluo-4, Rhod-2 y Rhod-5
• Retención intracelular mejorada
• Carga de células fácil y eficiente
• Localización citosólica homogénea.
• Cal-590™ con desplazamiento al rojo, Cal-630™, Cal-670™ y Cal-770™ se pueden usar con GFP u otros tintes verdes fluorescentes para multiplexación
• Cal-770™ puede usarse para estudios in vivo
• Disponibles como ésteres de AM permeables a la membrana (compatibles con imágenes, citometría de flujo y ensayos de microplacas, como HTS)
• Disponibles como derivados de sal impermeables a la membrana para carga mediante microinyección, pipeta de parche o carga pinocítica.
• Disponibles como colorantes reactivos para conjugación con un portador.
Respuestas de calcio estimuladas por ATP del receptor P2Y endógeno en células CHO-K1 incubadas con Cal-520® AM (curva roja) o Fluo-4 AM (curva azul) respectivamente sin probenecid. Se sembraron células CHO-K1 durante la noche a razón de 50.000 células por 100 µl por pocillo en una placa de 96 pocillos de pared negra/fondo transparente Costar. Se añadieron a las células 100 µl de Fluo-4 AM o Cal 520® AM 5 µM en HHBS (con o sin probenecid) y las células se incubaron a 37°C durante 1 hora. Se añadió ATP (50 µl/pocillo) usando FlexSation para lograr las concentraciones finales indicadas.
Tabla 8. Indicadores de calcio Cal-520® para imágenes de calcio en células vivas y ensayos de flujo de calcio multicolores.Tinte Ex (nm) Em (nm) Filtros Kd¹ Φ² FCa/FFree³ Presentación Cat No. Cal-500™, AM 388 482 DAPI 303 nM 0.48 ∼100 fold 10x50 µg 20412 Cal-500™, potassium salt 388 482 DAPI 303 nM 0.48 ∼100 fold 10x50 µg 20410 Cal-520®, AM 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21130 Cal-520®, potassium salt 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21140 Cal-590™ AM 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 5x50 µg 20510 Cal-590™ potassium salt 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 5x50 µg 20518 Cal-630™ AM 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 5x50 µg 20530 Cal-630™, potassium salt 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 5x50 µg 20538 Cal-670™, potassium salt 667 680 Cy5 853 nM N/D ∼100 fold 10x50 µg 20455 Cal-770™, potassium salt 758 783 Cy7 850 nM N/D ∼100 fold 10x50 µg 20460 Cal-520®, AM 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 1 mg 21131 Cal-520FF™, AM 493 515 FITC 9.8 µM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21143 Cal-520FF™, AM 493 515 FITC 9.8 µM 0.75 ∼100 fold 1 mg 21142 Cal-520N™, AM 493 515 FITC 90 µM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21146 Cal-520®, potassium salt 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 1 mg 21141 Cal-520®, sodium salt 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21135 Cal-520®, sodium salt 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 1 mg 21136 Cal-520FF™, potassium salt 493 515 FITC 9.8 µM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21144 Cal-520N™, potassium salt 493 515 FITC 90 µM 0.75 ∼100 fold 10x50 µg 21147 Cal-520®-Dextran Conjugate *MW 3,000* 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 1 mg 20600 Cal-520®-Dextran Conjugate *MW 10,000* 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 5 mg 20601 Cal-520L®-Dextran Conjugate *MW 10,000* 493 515 FITC 0.75 ∼100 fold 1 mg 20602 Cal-520®-Biotin Conjugate 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 5x50 µg 20605 Cal-520®-Biocytin Conjugate 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 5x50 µg 20606 Cal-520® NHS Ester 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 100 µg 20609 Cal-520® maleimide 493 515 FITC 320 nM 0.75 ∼100 fold 100 µg 20610 Cal-520® amine 493 515 FITC 0.75 ∼100 fold 100 µg 20612 Cal-520® azide 493 515 FITC 0.75 ∼100 fold 100 µg 20613 Cal-520® alkyne 493 515 FITC 0.75 ∼100 fold 100 µg 20614 Cal-520L™ maleimide 493 515 FITC 0.75 ∼100 fold 100 ug 20611 Cal-590™ AM 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 10x50 µg 20511 Cal-590™ AM 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 1 mg 20512 Cal-590™ potassium salt 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 1 mg 20519 Cal-590™ sodium salt 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 5x50 µg 20515 Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 1 mg 20508 Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 574 588 Cy3/TRITC 561 nM 0.62 ∼100 fold 1 mg 20509 Cal-590L® Dextran Conjugate *MW 10,000* 569 590 Cy3/TRITC ∼230 uM ∼100 fold 1 mg 20525 Cal-630™ AM 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 10x50 µg 20531 Cal-630™ AM 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 1 mg 20532 Cal-630™, sodium salt 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 5x50 µg 20535 Cal-630™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 609 626 Texas Red 792 nM 0.37 ∼100 fold 1 mg 20546 Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 667 680 Cy5 853 nM N/D ∼100 fold 1 mg 20456 Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 667 680 Cy5 853 nM N/D ∼100 fold 1 mg 20457 Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 3,000* 758 783 Cy7 853 nM N/D ∼100 fold 1 mg 20461 Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 10,000* 758 783 Cy7 853 nM N/D ∼100 fold 1 mg 20462
Indicadores de calcio Fluo 8®
Fluo-8® AM aborda una de las principales limitaciones comunes a los tintes a base de fluo, es decir, las duras condiciones requeridas para la carga celular. Los colorantes tradicionales a base de fluo, como Fluo-2 AM (Cat No. 20495), Fluo-3 AM (Cat No. 21013 y Fluo-4 AM (Cat No. 20550) deben cargarse e incubarse con células a 37 °C. durante hasta una hora antes de que se pueda tomar una lectura. Esto no solo somete a las células a temperaturas extremas, sino que también requiere que los usuarios dediquen tiempo a calentar y enfriar los cultivos celulares. Además, introduce la temperatura de incubación como una posible variable de confusión. AM resuelve todos estos problemas al proporcionar un indicador de calcio robusto que se puede cargar en las células a temperatura ambiente. Fluo-8® AM depende menos de la temperatura que otros tintes a base de fluo, lo que permite resultados más consistentes en una gama más amplia de condiciones experimentales. Además, con un tiempo de incubación de tan solo 20 minutos, Fluo-8® AM permite una respuesta rápida para mejorar la productividad. La mejor parte es que incluso con modificaciones y mejoras estructurales, las propiedades espectrales de Fluo-8® AM permanecen sin cambios, manteniendo las características familiares. espectros de Fluo-4 AM (es decir. Ex/Em = 494/517 nm).
Características clave de los indicadores de calcio Fluo 8®
• Carga de células más rápida: Fluo 8® se puede cargar fácilmente en las células a temperatura ambiente. Fluo-3 AM y Fluo-4 AM requieren una temperatura de carga de 37°C
• Fluorescencia más brillante: Fluo 8® es 2 veces más brillante que Fluo-4 AM y 4 veces más brillante que Fluo-3 AM
• Conveniente: los espectros idénticos de Fluo 8® a los de Fluo-4 y Fluo-3 facilitan la actualización
Respuesta a la dosis de carbacol medida en células HEK-293. Se sembraron células Hek-293 durante la noche a razón de 40.000 células/100 µl/pocillo en una placa de 96 pocillos de pared negra/fondo transparente Costar. Las células se incubaron con 100 µl de solución de carga de tinte usando Fluo-8® AM (n.º de catálogo 21083) o Fluo-4 AM (n.º de catálogo 20550) durante 1 hora a temperatura ambiente. NOVOstar (BMG Labtech) añadió carbacol (50 µl/pocillo) para lograr las concentraciones finales indicadas.
Tabla 9. Indicadores de calcio fluorescentes verdes Fluo-8® para imágenes de calcio en células vivas.Indicador Ex (nm) Em (nm) Kd¹ Φ² FCa/FFree³ Presentación Cat No. Fluo-8®, AM 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21080 Fluo-8®, AM 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21082 Fluo-8®, AM 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 20x50 µg 21083 Fluo-8®, AM 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 5x50 µg 21081 Fluo-8H™, AM 495 516 232 nM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21091 Fluo-8H™, AM 495 516 232 nM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21090 Fluo-8L™, AM 495 516 1.9 µM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21096 Fluo-8L™, AM 495 516 1.9 µM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21097 Fluo-8FF™, AM 495 516 10 µM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21104 Fluo-8FF™, AM 495 516 10 µM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21105 Fluo-8®, potassium salt 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21087 Fluo-8®, potassium salt 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21089 Fluo-8®, sodium salt 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21086 Fluo-8®, sodium salt 495 516 389 nM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21088 Fluo-8H™, sodium salt 495 516 232 nM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21095 Fluo-8L™, sodium salt 495 516 1.9 µM 0.16 ∼200 fold 10x50 µg 21098 Fluo-8L™, sodium salt 495 516 1.9 µM 0.16 ∼200 fold 1 mg 21099
Indicadores de calcio Fluo-3 y Fluo-4
Fluo-3 es un indicador de calcio introducido por primera vez en 1989 para su uso en citometría de flujo y microscopía de barrido láser confocal. Fluo-3, un compuesto similar a la fluoresceína, no es fluorescente en ausencia de Ca2+ libre. Sin embargo, al unirse al calcio, Fluo-3 experimenta un fuerte aumento en la intensidad de la emisión a 525 nm. Como indicador, Fluo-3 ha sido fundamental en el estudio de las vías de señalización celular, los miocitos y la activación de neurotransmisores.
Fluo-4 se basa en la estructura central de Fluo-3, pero modificándola para aumentar la intensidad de la señal de fluorescencia. La modificación en la estructura química provoca un cambio al azul en el máximo de excitación de Fluo-4, de 506 nm (de Fluo-3) a 494 nm. En la práctica, este cambio de 12 nm acerca el máximo de excitación de Fluo-4 a la longitud de onda de un láser de argón estándar (es decir, 488 nm). Esto da como resultado una mejor excitación y, por tanto, una señal fluorescente que es significativamente más brillante y más sensible a los cambios en la concentración de calcio.
Se sembraron células U2OS durante la noche a razón de 40.000 células/100 µl/pocillo en una placa costar de pared negra/fondo transparente de 96 pocillos. Se eliminó el medio de crecimiento y las células se incubaron con 100 µL de Fluo-3 AM, Fluo-4 AM y Fluo-8® AM en HHBS a una concentración de 4 µM en una incubadora a 37 °C y 5 % de CO2 durante 1 hora. Las células se lavaron dos veces con 200 µl de HHBS y luego se tomaron imágenes con un microscopio de fluorescencia (Olympus IX71) usando el canal FITC.
Tabla 10. Fluo-3, Fluo-4 y Fluo-5, indicadores fluorescentes verdes para obtener imágenes de calcio en células vivas.Indicator Ex (nm) Em (nm) Filter Set Kd¹ Φ² FCa/FFree³ Presentación Cat No. Fluo-3, AM *UltraPure grade* *CAS 121714-22-5* 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21011 Fluo-3, AM *Bulk package* *CAS 121714-22-5* 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 50 mg 21012 Fluo-3, AM *CAS 121714-22-5* 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21010 Fluo-3, AM *UltraPure grade* *CAS 121714-22-5* 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21013 Fluo-3, pentapotassium salt 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21017 Fluo-3, pentaammonium salt 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21018 Fluo-3, pentasodium salt 507 516 FITC 390 nM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21016 Fluo-3FF, pentapotassium salt 507 516 FITC 100 µM 0.15 ∼100 fold 1 mg 21019 Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* 495 528 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold 1 mg 20550 Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* 495 528 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold 10x50 µg 20551 Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* 495 528 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold 5x50 µg 20552 Fluo-4, Pentapotassium Salt 495 528 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold 1 mg 20555 Fluo-4, Pentapotassium Salt 495 528 FITC 345 nM 0.16 ∼100 fold 1 mg 20556 Fluo-5F, AM 494 516 FITC 2.3 µM 0.16 ∼100 fold 10x50 µg 20560 Fluo-5N, AM 494 516 FITC 90 µM 0.16 ∼100 fold 10x50 µg 20566 Fluo-5F, pentapotassium salt 494 516 FITC 2.3 µM 0.16 ∼100 fold 500 µg 20562 Fluo-5N, pentapotassium salt 494 516 FITC 90 µM 0.16 ∼100 fold 500 µg 20567
Ensayos de calcio para la detección de GPCR y objetivos de canales de calcio
Los ensayos de flujo de calcio Screen Quest™ son el método preferido en la detección de alto rendimiento (HTS) basada en células para determinar la señalización estimulada por agonistas e inhibida por antagonistas a través de receptores acoplados a proteína G (GPCR). Hasta la fecha, aproximadamente un tercio de los medicamentos disponibles en el mercado están diseñados para atacar los GPCR. El ensayo de calcio Screen Quest™ ofrece un ensayo conveniente basado en fluorescencia homogénea y sin lavado para monitorear GPCR y canales de calcio, y para detectar la movilización de calcio intracelular en un amplio espectro de objetivos biológicos. El ensayo se puede realizar en un formato conveniente de placa de microtitulación de 96 o 384 pocillos y se puede adaptar fácilmente para la automatización. Los ensayos de calcio Screen Quest™ están optimizados y validados para los siguientes instrumentos: FDSS®, FLIPR®, ViewLux™, NOVOStar, ArrayScan™, FlexStation® e IN Cell Analyzer.
Características clave de los indicadores de calcio Screen Quest™
• Protocolos optimizados validados para una amplia gama de lectores de microplacas
• Intensidad de señal superior (altas relaciones S/B) y uniformidad entre pozos
• Amplia ventana de ensayo para analizar receptores y líneas celulares desafiantes
• Ensayos de flujo de calcio de alto rendimiento para placas de 1536 pocillos
Comparación de la respuesta de la señal fluorescente del receptor P2Y endógeno al ATP en células CHO-K1 utilizando el kit de ensayo de calcio Screen Quest™ Calbryte™ 520, el ensayo de calcio 4 FLIPR® (dispositivos moleculares) y el ensayo de calcio Fluo-4 Direct™ (Molecular Probes®) . Se sembraron células CHO-K1 durante la noche a razón de 50.000 células/100 µl/pocillo en una placa costar de 96 pocillos con pared negra y fondo transparente. La respuesta del flujo de calcio se midió con los tres ensayos, respectivamente. FlexStation 3 añadió ATP (50 µl/pocillo) para lograr las concentraciones finales indicadas.
Tabla 11. Ensayos de calcio Screen Quest™ para la detección de GPCR y objetivos de canales de calcioEnsayo Ex (nm) Em (nm) Cutoff (nm) Presentación Cat No. Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 515 10 plates 36325 Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 515 100 plates 36326 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 1 plates 36314 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 10 plates 36315 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 100 plates 36316 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 100 plates 36316 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 1 plates 36307 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 10 plates 36308 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 100 plates 36309 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 1 plates 36317 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 10 plates 36318 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 100 plates 36319 Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 340, 380 510 470 10 plates 36320 Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 340, 380 510 470 100 plates 36321 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 1 plates 36333 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 10 plates 36334 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 100 plates 36335 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 1 plates 36330 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 10 plates 36331 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 100 plates 36332 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 1 plates 36200 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 10 plates 36201 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 100 plates 36202
Información de Producto
Tabla 12. Ensayos de calcio Cell Meter™ y otros indicadores de calcioProducto Ex (nm) Em (nm) Presentación Cat No. Cell Meter™ Flow Cytometric Calcium Assay Kit 493 515 100 Tests 36310 Cell Meter™ No Wash and Probenecid-Free Endpoint Calcium Assay Kit *Optimized for microplate reader* 495 525 100 Tests 36312 OG488 BAPTA-1, hexapotassium salt [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, hexapotassium salt] *Cell impermeant* 493 522 500 µg 20506 OG488 BAPTA-1, AM [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, AM] *Cell permeant* 493 522 10x50 µg 20507
Table 13. Quelantes de calcio impermeables a las célulasProducto Presentación Cat No. EDTA, AM ester 10x50 µg 19010 BAPTA, AM *CAS 126150-97-8* 25 mg 21001 BAPTA, AM *UltraPure Grade* *CAS 126150-97-8* 25 mg 21002 EGTA AM *CAS 99590-86-0* 10 mg 21005 EGTA AM *10 mM DMSO solution* 1 mL 21006 Quin-2, AM *CAS 83104-85-2* 1 mg 21050 Quin-2, tetrapotassium salt *CAS 149022-19-5* 5 mg 21052
| Tinte | Ex (nm) | Em (nm) | Filtros | Kd¹ | Φ² | FCa/FFree³ | Presentación | Cat No. |
| Cal-500™, AM | 388 | 482 | DAPI | 303 nM | 0.48 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20412 |
| Cal-500™, potassium salt | 388 | 482 | DAPI | 303 nM | 0.48 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20410 |
| Cal-520®, AM | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21130 |
| Cal-520®, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21140 |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20510 |
| Cal-590™ potassium salt | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20518 |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20530 |
| Cal-630™, potassium salt | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20538 |
| Cal-670™, potassium salt | 667 | 680 | Cy5 | 853 nM | N/D | ∼100 fold | 10x50 µg | 20455 |
| Cal-770™, potassium salt | 758 | 783 | Cy7 | 850 nM | N/D | ∼100 fold | 10x50 µg | 20460 |
| Cal-520®, AM | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 21131 |
| Cal-520FF™, AM | 493 | 515 | FITC | 9.8 µM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21143 |
| Cal-520FF™, AM | 493 | 515 | FITC | 9.8 µM | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 21142 |
| Cal-520N™, AM | 493 | 515 | FITC | 90 µM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21146 |
| Cal-520®, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 21141 |
| Cal-520®, sodium salt | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21135 |
| Cal-520®, sodium salt | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 21136 |
| Cal-520FF™, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 9.8 µM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21144 |
| Cal-520N™, potassium salt | 493 | 515 | FITC | 90 µM | 0.75 | ∼100 fold | 10x50 µg | 21147 |
| Cal-520®-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 20600 |
| Cal-520®-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 5 mg | 20601 |
| Cal-520L®-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 493 | 515 | FITC | 0.75 | ∼100 fold | 1 mg | 20602 | |
| Cal-520®-Biotin Conjugate | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20605 |
| Cal-520®-Biocytin Conjugate | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20606 |
| Cal-520® NHS Ester | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 100 µg | 20609 |
| Cal-520® maleimide | 493 | 515 | FITC | 320 nM | 0.75 | ∼100 fold | 100 µg | 20610 |
| Cal-520® amine | 493 | 515 | FITC | 0.75 | ∼100 fold | 100 µg | 20612 | |
| Cal-520® azide | 493 | 515 | FITC | 0.75 | ∼100 fold | 100 µg | 20613 | |
| Cal-520® alkyne | 493 | 515 | FITC | 0.75 | ∼100 fold | 100 µg | 20614 | |
| Cal-520L™ maleimide | 493 | 515 | FITC | 0.75 | ∼100 fold | 100 ug | 20611 | |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20511 |
| Cal-590™ AM | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 1 mg | 20512 |
| Cal-590™ potassium salt | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 1 mg | 20519 |
| Cal-590™ sodium salt | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20515 |
| Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 1 mg | 20508 |
| Cal-590™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 574 | 588 | Cy3/TRITC | 561 nM | 0.62 | ∼100 fold | 1 mg | 20509 |
| Cal-590L® Dextran Conjugate *MW 10,000* | 569 | 590 | Cy3/TRITC | ∼230 uM | ∼100 fold | 1 mg | 20525 | |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20531 |
| Cal-630™ AM | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 1 mg | 20532 |
| Cal-630™, sodium salt | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20535 |
| Cal-630™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 609 | 626 | Texas Red | 792 nM | 0.37 | ∼100 fold | 1 mg | 20546 |
| Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 667 | 680 | Cy5 | 853 nM | N/D | ∼100 fold | 1 mg | 20456 |
| Cal-670™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 667 | 680 | Cy5 | 853 nM | N/D | ∼100 fold | 1 mg | 20457 |
| Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 3,000* | 758 | 783 | Cy7 | 853 nM | N/D | ∼100 fold | 1 mg | 20461 |
| Cal-770™-Dextran Conjugate *MW 10,000* | 758 | 783 | Cy7 | 853 nM | N/D | ∼100 fold | 1 mg | 20462 |
| Indicador | Ex (nm) | Em (nm) | Kd¹ | Φ² | FCa/FFree³ | Presentación | Cat No. | |
| Fluo-8®, AM | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21080 | |
| Fluo-8®, AM | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21082 | |
| Fluo-8®, AM | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 20x50 µg | 21083 | |
| Fluo-8®, AM | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 5x50 µg | 21081 | |
| Fluo-8H™, AM | 495 | 516 | 232 nM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21091 | |
| Fluo-8H™, AM | 495 | 516 | 232 nM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21090 | |
| Fluo-8L™, AM | 495 | 516 | 1.9 µM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21096 | |
| Fluo-8L™, AM | 495 | 516 | 1.9 µM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21097 | |
| Fluo-8FF™, AM | 495 | 516 | 10 µM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21104 | |
| Fluo-8FF™, AM | 495 | 516 | 10 µM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21105 | |
| Fluo-8®, potassium salt | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21087 | |
| Fluo-8®, potassium salt | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21089 | |
| Fluo-8®, sodium salt | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21086 | |
| Fluo-8®, sodium salt | 495 | 516 | 389 nM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21088 | |
| Fluo-8H™, sodium salt | 495 | 516 | 232 nM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21095 | |
| Fluo-8L™, sodium salt | 495 | 516 | 1.9 µM | 0.16 | ∼200 fold | 10x50 µg | 21098 | |
| Fluo-8L™, sodium salt | 495 | 516 | 1.9 µM | 0.16 | ∼200 fold | 1 mg | 21099 |
| Indicator | Ex (nm) | Em (nm) | Filter Set | Kd¹ | Φ² | FCa/FFree³ | Presentación | Cat No. |
| Fluo-3, AM *UltraPure grade* *CAS 121714-22-5* | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21011 |
| Fluo-3, AM *Bulk package* *CAS 121714-22-5* | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 50 mg | 21012 |
| Fluo-3, AM *CAS 121714-22-5* | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21010 |
| Fluo-3, AM *UltraPure grade* *CAS 121714-22-5* | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21013 |
| Fluo-3, pentapotassium salt | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21017 |
| Fluo-3, pentaammonium salt | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21018 |
| Fluo-3, pentasodium salt | 507 | 516 | FITC | 390 nM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21016 |
| Fluo-3FF, pentapotassium salt | 507 | 516 | FITC | 100 µM | 0.15 | ∼100 fold | 1 mg | 21019 |
| Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* | 495 | 528 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | 1 mg | 20550 |
| Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* | 495 | 528 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20551 |
| Fluo-4 AM *Ultrapure Grade* *CAS 273221-67-3* | 495 | 528 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | 5x50 µg | 20552 |
| Fluo-4, Pentapotassium Salt | 495 | 528 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | 1 mg | 20555 |
| Fluo-4, Pentapotassium Salt | 495 | 528 | FITC | 345 nM | 0.16 | ∼100 fold | 1 mg | 20556 |
| Fluo-5F, AM | 494 | 516 | FITC | 2.3 µM | 0.16 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20560 |
| Fluo-5N, AM | 494 | 516 | FITC | 90 µM | 0.16 | ∼100 fold | 10x50 µg | 20566 |
| Fluo-5F, pentapotassium salt | 494 | 516 | FITC | 2.3 µM | 0.16 | ∼100 fold | 500 µg | 20562 |
| Fluo-5N, pentapotassium salt | 494 | 516 | FITC | 90 µM | 0.16 | ∼100 fold | 500 µg | 20567 |
Ensayos de calcio para la detección de GPCR y objetivos de canales de calcio
Los ensayos de flujo de calcio Screen Quest™ son el método preferido en la detección de alto rendimiento (HTS) basada en células para determinar la señalización estimulada por agonistas e inhibida por antagonistas a través de receptores acoplados a proteína G (GPCR). Hasta la fecha, aproximadamente un tercio de los medicamentos disponibles en el mercado están diseñados para atacar los GPCR. El ensayo de calcio Screen Quest™ ofrece un ensayo conveniente basado en fluorescencia homogénea y sin lavado para monitorear GPCR y canales de calcio, y para detectar la movilización de calcio intracelular en un amplio espectro de objetivos biológicos. El ensayo se puede realizar en un formato conveniente de placa de microtitulación de 96 o 384 pocillos y se puede adaptar fácilmente para la automatización. Los ensayos de calcio Screen Quest™ están optimizados y validados para los siguientes instrumentos: FDSS®, FLIPR®, ViewLux™, NOVOStar, ArrayScan™, FlexStation® e IN Cell Analyzer.
Características clave de los indicadores de calcio Screen Quest™
• Protocolos optimizados validados para una amplia gama de lectores de microplacas
• Intensidad de señal superior (altas relaciones S/B) y uniformidad entre pozos
• Amplia ventana de ensayo para analizar receptores y líneas celulares desafiantes
• Ensayos de flujo de calcio de alto rendimiento para placas de 1536 pocillos
Comparación de la respuesta de la señal fluorescente del receptor P2Y endógeno al ATP en células CHO-K1 utilizando el kit de ensayo de calcio Screen Quest™ Calbryte™ 520, el ensayo de calcio 4 FLIPR® (dispositivos moleculares) y el ensayo de calcio Fluo-4 Direct™ (Molecular Probes®) . Se sembraron células CHO-K1 durante la noche a razón de 50.000 células/100 µl/pocillo en una placa costar de 96 pocillos con pared negra y fondo transparente. La respuesta del flujo de calcio se midió con los tres ensayos, respectivamente. FlexStation 3 añadió ATP (50 µl/pocillo) para lograr las concentraciones finales indicadas.
Tabla 11. Ensayos de calcio Screen Quest™ para la detección de GPCR y objetivos de canales de calcioEnsayo Ex (nm) Em (nm) Cutoff (nm) Presentación Cat No. Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 515 10 plates 36325 Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 515 100 plates 36326 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 1 plates 36314 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 10 plates 36315 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 100 plates 36316 Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit 490 525 510 100 plates 36316 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 1 plates 36307 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 10 plates 36308 Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* 490 525 510 100 plates 36309 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 1 plates 36317 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 10 plates 36318 Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 490 525 515 100 plates 36319 Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 340, 380 510 470 10 plates 36320 Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit 340, 380 510 470 100 plates 36321 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 1 plates 36333 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 10 plates 36334 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit 540 590 570 100 plates 36335 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 1 plates 36330 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 10 plates 36331 Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* 540 590 570 100 plates 36332 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 1 plates 36200 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 10 plates 36201 Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit 540 590 570 100 plates 36202
| Ensayo | Ex (nm) | Em (nm) | Cutoff (nm) | Presentación | Cat No. |
| Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 515 | 10 plates | 36325 |
| Screen Quest™ Fluo-4 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 515 | 100 plates | 36326 |
| Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 510 | 1 plates | 36314 |
| Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 510 | 10 plates | 36315 |
| Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 510 | 100 plates | 36316 |
| Screen Quest™ Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 510 | 100 plates | 36316 |
| Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* | 490 | 525 | 510 | 1 plates | 36307 |
| Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* | 490 | 525 | 510 | 10 plates | 36308 |
| Screen Quest™ Fluo-8 Medium Removal Calcium Assay Kit *Optimized for Difficult Cell Lines* | 490 | 525 | 510 | 100 plates | 36309 |
| Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 515 | 1 plates | 36317 |
| Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 515 | 10 plates | 36318 |
| Screen Quest™ Calbryte-520 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 490 | 525 | 515 | 100 plates | 36319 |
| Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit | 340, 380 | 510 | 470 | 10 plates | 36320 |
| Screen Quest™ Fura-2 No Wash Calcium Assay Kit | 340, 380 | 510 | 470 | 100 plates | 36321 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 1 plates | 36333 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 10 plates | 36334 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 100 plates | 36335 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* | 540 | 590 | 570 | 1 plates | 36330 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* | 540 | 590 | 570 | 10 plates | 36331 |
| Screen Quest™ Rhod-4 No Wash Calcium Assay Kit *Medium Removal* | 540 | 590 | 570 | 100 plates | 36332 |
| Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 1 plates | 36200 |
| Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 10 plates | 36201 |
| Screen Quest™ Calbryte-590 Probenecid-Free and Wash-Free Calcium Assay Kit | 540 | 590 | 570 | 100 plates | 36202 |
Información de Producto
Tabla 12. Ensayos de calcio Cell Meter™ y otros indicadores de calcioProducto Ex (nm) Em (nm) Presentación Cat No. Cell Meter™ Flow Cytometric Calcium Assay Kit 493 515 100 Tests 36310 Cell Meter™ No Wash and Probenecid-Free Endpoint Calcium Assay Kit *Optimized for microplate reader* 495 525 100 Tests 36312 OG488 BAPTA-1, hexapotassium salt [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, hexapotassium salt] *Cell impermeant* 493 522 500 µg 20506 OG488 BAPTA-1, AM [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, AM] *Cell permeant* 493 522 10x50 µg 20507
| Producto | Ex (nm) | Em (nm) | Presentación | Cat No. |
| Cell Meter™ Flow Cytometric Calcium Assay Kit | 493 | 515 | 100 Tests | 36310 |
| Cell Meter™ No Wash and Probenecid-Free Endpoint Calcium Assay Kit *Optimized for microplate reader* | 495 | 525 | 100 Tests | 36312 |
| OG488 BAPTA-1, hexapotassium salt [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, hexapotassium salt] *Cell impermeant* | 493 | 522 | 500 µg | 20506 |
| OG488 BAPTA-1, AM [equivalent to Oregon Green® 488 BAPTA-1, AM] *Cell permeant* | 493 | 522 | 10x50 µg | 20507 |
Table 13. Quelantes de calcio impermeables a las célulasProducto Presentación Cat No. EDTA, AM ester 10x50 µg 19010 BAPTA, AM *CAS 126150-97-8* 25 mg 21001 BAPTA, AM *UltraPure Grade* *CAS 126150-97-8* 25 mg 21002 EGTA AM *CAS 99590-86-0* 10 mg 21005 EGTA AM *10 mM DMSO solution* 1 mL 21006 Quin-2, AM *CAS 83104-85-2* 1 mg 21050 Quin-2, tetrapotassium salt *CAS 149022-19-5* 5 mg 21052
| Producto | Presentación | Cat No. |
| EDTA, AM ester | 10x50 µg | 19010 |
| BAPTA, AM *CAS 126150-97-8* | 25 mg | 21001 |
| BAPTA, AM *UltraPure Grade* *CAS 126150-97-8* | 25 mg | 21002 |
| EGTA AM *CAS 99590-86-0* | 10 mg | 21005 |
| EGTA AM *10 mM DMSO solution* | 1 mL | 21006 |
| Quin-2, AM *CAS 83104-85-2* | 1 mg | 21050 |
| Quin-2, tetrapotassium salt *CAS 149022-19-5* | 5 mg | 21052 |